前病毒激活劑與補體活化劑的聯(lián)合使用在清除HIV-1病毒庫中的作用.pdf

1、目前研究普遍認為HIV-1潛伏庫是根除和治療HIV-1感染的主要障礙。歸其原因，主要是由于HIV-1病毒顆粒和感染的細胞會利用其表面的補體活化調(diào)節(jié)蛋白(RCA)去逃避抗體依賴補體介導的裂解(ADCML)。為了識別并根除這些病毒顆粒和感染的細胞，我們聯(lián)合使用了前病毒激活劑和CD59（一個重要的RCA組成成分）阻斷劑去觸發(fā)這種抗體依賴補體介導的裂解(ADCML)。這些前病毒激活劑包括羅米地辛(RMD)、辛二酰苯胺異羥戊酸(SAHA)和酪氨酸

2、激酶抑制劑(prostratin)。選擇這些藥物的原因是由于它們不僅能夠激活潛伏感染的T細胞系(ACH-2)和原代CD4+T細胞中的前病毒，而且能使這些細胞產(chǎn)生病毒顆粒以及增強細胞表面病毒蛋白的表達。本研究中我們發(fā)現(xiàn)RMD是一種很具有臨床應用前景的藥物。首先，在毫微摩爾濃度下，它便能有效激活前病毒。其次，在激活的ACH-2和原代靜息CD4+T細胞中，前病毒表達的HIV-1 Env與細胞表面脂筏結(jié)構(gòu)上的CD59存在共定位，而且CD59阻斷

3、劑與抗HIV-1單克隆抗體或HIV-1病人血漿的聯(lián)合使用能夠使激活的ACH-2和原代靜息CD4+T細胞對ADCML敏感。
　　相關(guān)文獻表明RCA生物學功能的阻斷，尤其是CD59（一種在補體激活終末階段決定膜攻擊復合物形成的蛋白），能使HIV-1病毒顆粒和感染的細胞變得對病毒感染不同階段的抗Env抗體以及病人血清或血漿介導的ADCML敏感。在HIV-1感染的患者中，盡管針對病毒的特異性抗體反應在各個階段都較強，但這種較強的抗體反應對

4、于控制病毒的增殖作用甚微。所以針對抗HIV-1中和抗體(nAbs)，非中和抗體(non-nAbs)或者兩者是否能夠增強CD59阻斷后ADCML的研究，對于HIV-1的治療非常重要。在本實驗中，我們應用了目前廣泛認可的nAbs（2G12，2F5和4E10）和non-nAbs(2.2C，A32，N5-i5和N12-i15)。實驗結(jié)果表明:所有的nAbs和兩種non-nAbs（N5-i5和A32）都能夠與HIV-1 R5，X4和R5/X4嗜性

5、毒株，6種原代分離株以及前病毒被激活的ACH-2細胞明顯反應，相比而言，non-nAbs(2.2C)對這些靶標的作用相對較弱，N12-i15對其不作用。但對于反應的抗體而言，不管其是否有中和作用，CD59功能的阻斷都能顯著性地增強其特異性的ADCML，而且這種ADCML效應與抗體對其靶標的反應強度呈正相關(guān)。因此，對于修復nAbs和non-nAbs所觸發(fā)的針對HIV-1病毒顆粒和前病毒激活的潛伏感染細胞的ADCML而言，RCA功能的阻斷也