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文檔簡介
1、目的:探討紅霉素對香煙煙霧提取物(CSE)刺激的人巨噬細(xì)胞表達(dá)炎癥介質(zhì)白細(xì)胞介素8(IL-8)和核因子κB(NF-κB)的影響。
方法:體外培養(yǎng)U937細(xì)胞,用佛波脂(PMA,10ng/ml)將其誘導(dǎo)分化為巨噬細(xì)胞。應(yīng)用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法觀察不同濃度的香煙煙霧提取物(0.1%、1%、2.5%)和紅霉素(0.1、1、10ug/ml)對細(xì)胞生長的影響。將巨噬細(xì)胞分成對照組、核因子κB抑制劑組(PDTC)、香煙煙霧提取物
2、組、紅霉素(EM)+香煙煙霧提取物組。對照組細(xì)胞不做處理,核因子κB抑制劑組先用CSE刺激,再加入NF-κB的特異性抑制劑吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC),香煙煙霧提取物組用1%的CSE刺激,紅霉素+香煙煙霧提取物組先用1ug/ml的紅霉素孵育,再加入1%的CSE刺激。用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測定細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-8濃度,用凝膠遷移率阻滯實驗(EMSA)測定核因子κB(NF-κB)的活性。用SPSS軟件包處理數(shù)據(jù)。
3、 結(jié)果:0.1%、1%的CSE和0.1、1、10ug/ml的紅霉素對巨噬細(xì)胞生長沒有影響,而2.5%的CSE有影響;CSE(1%)刺激(24h)后,巨噬細(xì)胞上清液中的IL-8含量升高,而紅霉素(1ug/ml)預(yù)孵育24h、48h可以抑制CSE(1%)刺激引起的巨噬細(xì)胞上清液中IL-8含量升高(24h,對照組103.52±3.33pg/ml,CSE組264.93±14.89pg/ml,EM+CSE組196.70±14.13pg/ml;
4、48h,對照組114.03±8.01pg/ml,CSE組283.02±15.62pg/ml,EM+CSE組214.17±13.71pg/ml;P<0.05);CSE(1%)刺激后(24h),巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的活性增強(qiáng),紅霉素(1ug/ml)孵育24h、48h均可以抑制的NF-κB活性。
結(jié)論:香煙煙霧提取物可以使巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的活性增強(qiáng),并使細(xì)胞釋放的IL-8增多;紅霉素能夠通過下調(diào)轉(zhuǎn)錄因子NF-κB
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