隨機(jī)RNA文庫的構(gòu)建及其初步應(yīng)用.pdf

1、中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院碩士學(xué)位論文隨機(jī)RNA文庫的構(gòu)建及其初步應(yīng)用姓名：張達(dá)矜申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師：范明;邵寧生2001.6.4中文摘要隨機(jī)R N A 文庫的構(gòu)建及其在神經(jīng)生物學(xué)中的初步應(yīng)用碩士生 張達(dá)矜導(dǎo)師 范明 邵寧生( 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所1 0 0 8 5 0 北京)俑 要p ( S E L E X ( S y s t e m a t i c E v o l u t i o no f l i

2、g a n d sb yE x p o n e n t i a lE n r i c h m e n t ) 是9 0年代初新興的一種利用隨機(jī)寡核苷酸( D N A 或R N A ) 文庫篩選靶分子特異性配基的組合化學(xué)技術(shù)。其中最常用的隨機(jī)寡核苷酸文庫為隨機(jī)R N A 文庫。這是因?yàn)镽 N A 分子中除G ．C 、A - u 堿基配對外，還有G ．u 等變偶堿基對的存在，可以形成多種構(gòu)像，即使一段很小的R N A 分子也能形成具有相當(dāng)穩(wěn)

3、定的剛性結(jié)構(gòu)。對于一個具有2 5 個隨機(jī)序列的隨機(jī)R N A 文庫，可以產(chǎn)生約1 0 1 5 個含有不同空間結(jié)構(gòu)的R N A分子，擁有巨大的篩選潛力。與其他組合化學(xué)文庫相比，隨機(jī)R N A 文庫具有篩選靶分子譜廣、篩選得到的R N A 配基親和力高和特異性強(qiáng)等特點(diǎn)。在近十年的時間里，已利用該項(xiàng)技術(shù)篩選出核酸結(jié)合蛋白、細(xì)胞因子、多肽、有機(jī)染料、維生素、A T P 、金屬離子等幾十種靶分子的特異R N A 配基。S E L E X 技術(shù)已成

4、為近年來的研究熱點(diǎn)。目前，S E L E X 技術(shù)在神經(jīng)科學(xué)中的應(yīng)用還鮮有報道。但是，S E L E X 技術(shù)作為一種高效的配基篩選技術(shù)以及研究R N A 與其它生物分子相互作用的直接而便捷的方法，在神經(jīng)科學(xué)研究中必將發(fā)揮巨大的作用。F 7 一本課題目的在于完成兩種隨機(jī)R N A 文庫的構(gòu)建，并將其初步應(yīng)用于神經(jīng)科學(xué)具有重要生物學(xué)功能的靶分子配基的篩選中。f 我們選用的靶分子是T N F ．o L ( 腫瘤壞死因子) 。T N F ．o