LC-M S-M S測定血漿鹽酸美普他酚及其臨床應(yīng)用研究.pdf

1、疼痛給患者帶來了巨大的痛苦，臨床上短期內(nèi)治療疼痛最有效的方法是藥物療法，麻醉性強效鎮(zhèn)痛藥有嗎啡、度冷丁等，但是這些藥物的副作用較大，成癮性強。新型鎮(zhèn)痛藥鹽酸美普他酚的依賴性小且安全性高，為了探究劑量、食物和性別等因素對鹽酸美普他酚片劑在體內(nèi)吸收速率和程度的影響，降低新劑型膠囊的上市成本以及研究鹽酸美普他酚在體內(nèi)生成的代謝物，本文建立了LC-MS/MS分析法分別測定人血漿鹽酸美普他酚及其代謝物的濃度，并將其應(yīng)用于藥物代謝動力學(xué)研究、藥物等

2、效性評價和藥物代謝物分析，具體的研究內(nèi)容如下：
　　以C18(5μm,2.1×50mm)為色譜柱，流動相分別為含0.05％甲酸和5mM乙酸銨的水溶液和乙腈，設(shè)置0.40mL/min的流速、20?L的進樣量和梯度洗脫的方式，并以美普他酚-d3為內(nèi)標，234.2→107.1（美普他酚）與237.3→107.1（內(nèi)標）為定量檢測離子對，建立測定血漿鹽酸美普他酚濃度的LC-MS/MS分析方法。在1.26~224ng/mL的線性范圍內(nèi)進行方

3、法學(xué)的確證，結(jié)果顯示該方法的特異性良好，不受氨基酸等內(nèi)源性物質(zhì)的干擾；標準曲線的線性相關(guān)系數(shù)為0.9995；批內(nèi)與批間精密度的RSD為2.50%~8.80%，準確度為90.99%~105.11%；經(jīng)甲醇沉淀蛋白后的提取回收率為86.46%~91.26%，內(nèi)標歸一化后的基質(zhì)效應(yīng)RSD為2.13%~2.49%，穩(wěn)定性的RSD為0.10%~7.00%，故該方法適用于血漿樣品中鹽酸美普他酚的濃度。然后以實測藥物濃度為基本依據(jù)，并利用相關(guān)統(tǒng)計學(xué)軟

4、件，分析劑量與片劑主要藥代參數(shù)的相關(guān)性，性別和食物的影響，以及體內(nèi)蓄積的傾向。同時，也可以判斷等劑量的鹽酸美普他酚片劑與膠囊在體內(nèi)的等效性結(jié)果。
　　MS模式下，用氣動輔助電噴霧離子化(ESI)和選擇性離子檢測(MRM)的方式，在500℃的離子源溫度、60V的解簇電壓(DP)、40Psi的氣簾氣(CUR)、40Psi的霧化氣和50Ps i的輔助氣等最佳的質(zhì)譜條件下，對血漿中鹽酸美普他酚的代謝物進行鑒別。根據(jù)實際樣品質(zhì)譜圖中碎片離子

5、([M+H]+)的質(zhì)荷比判斷鹽酸美普他酚體內(nèi)代謝物，當(dāng)質(zhì)荷比為248.2、250.3和220.2時，經(jīng)結(jié)構(gòu)解析為3–乙基–3–(3–羥苯基)–1–甲基六氫–2H–氮雜卓–7–酮、3–(2–羥乙基)–3–(3–羥苯基)–1–甲基六氫–2H–氮雜卓和3–乙基–六氫–3–(3–羥基苯基)–2H–氮雜卓三個鹽酸美普他酚I相代謝物，還檢測到與葡萄糖醛酸和硫酸結(jié)合的II相代謝物。分別以10mM乙酸銨水溶液和乙腈為流動相，并用鹽酸美普他酚-d3做內(nèi)標