KK-42對(duì)日本沼蝦蛻皮激素及其受體表達(dá)的影響.pdf

1、日本沼蝦（Macrobrachiumnipponense）是我國(guó)重要的淡水經(jīng)濟(jì)蝦類。前期研究已經(jīng)證明，KK-42處理日本沼蝦幼蝦，可以顯著促進(jìn)其生長(zhǎng)，但是對(duì)于KK-42促進(jìn)日本沼蝦生長(zhǎng)的機(jī)理仍不了解。鑒于蛻皮激素受體(ecdysteroidreceptor,EcR)和維甲酸X受體(retinoid-X-receptor,RXR)在甲殼動(dòng)物生長(zhǎng)和發(fā)育中的重要作用，以日本沼蝦為材料，研究了上述兩種基因的表達(dá)與蛻皮周期的相關(guān)性，并研究了KK-

2、42對(duì)上述兩種基因表達(dá)的影響，結(jié)合測(cè)定血淋巴中20-羥蛻皮酮(20-hydroxyecdysone，20E)滴度，旨在從分子水平探討KK-42促生長(zhǎng)的機(jī)制。
　　 將體長(zhǎng)4.5±0.5cm的日本沼蝦隨機(jī)分成2組:實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，其中，實(shí)驗(yàn)組用1.95x10-4mol/L的KK-42溶液浸泡處理1min，對(duì)照組用不含KK-42的溶液做相同的處理。于KK-42處理后不同時(shí)間解剖肝胰腺，用Real-timePCR方法測(cè)定EcRmRNA

3、和RXRmRNA的表達(dá)水平;于KK-42處理后不同時(shí)間抽取血淋巴，采用反相高效液相色譜（reverse-phasehigh-performanceliquidchromatography,HPLC)檢測(cè)血淋巴中20E的滴度。結(jié)果如下:
　　 HPLC結(jié)果顯示，KK-42處理可顯著提高血淋巴中20E滴度，在處理后3h和6h比對(duì)照組分別增加了121.71％(P＜0.05)、268.96％(P＜0.01)。
　　 Real-t

4、imePCR結(jié)果表明，EcR在肝胰腺、肌肉、表皮和眼柄等組織均有表達(dá)，其中肝胰腺和表皮表達(dá)量最高;肝胰腺EcR基因的表達(dá)量在蛻皮前期(D2-3)最高，蛻皮后期(A)較低。KK-42處理可顯著誘導(dǎo)處于蛻皮間期的日本沼蝦肝胰腺EcRmRNA的水平，且在處理后第6h和第12h分別比對(duì)照組提高了233.56％(P＜0.01)和110.73％(P＜0.05)。
　　 Real-timePCR結(jié)果表明，RXR在肝胰腺、肌肉、表皮和眼柄等組織

5、均有表達(dá)，其中肝胰腺表達(dá)量最高:肝胰腺RXR基因的表達(dá)量在蛻皮前期(D2-3)最高，蛻皮后期(B)較低。KK-42處理可顯著誘導(dǎo)處于蛻皮間期的日本沼蝦肝胰腺RXRmRNA的水平，且在處理后第3h和第12h分別比對(duì)照組提高了195.53％(P＜0.01)和80.83％(P＜0.05)
　　 結(jié)論:EcR基因和RXR基因的表達(dá)與蛻皮周期具有一定的相關(guān)性，咪唑類物質(zhì)KK-42能夠顯著提高日本沼蝦血淋巴中20E滴度，誘導(dǎo)肝胰腺中EcR基