獸疫鏈球菌WSH24生產(chǎn)透明質(zhì)酸的發(fā)酵條件研究.pdf

1、透明質(zhì)酸(HyaluronicacidorHyaluronan，簡稱HA)是一種由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰氨基葡萄糖為重復(fù)單位，通過β(1-3)和β(1-4)糖苷鍵交替連接而成的直鏈高分子粘多糖，具有獨(dú)特的“鎖水”功能。HA在化妝品、外傷及關(guān)節(jié)和眼科手術(shù)、眼藥水等方面有廣泛的應(yīng)用。 獸疫鏈球菌WSH24是本研究室最近選育的高產(chǎn)透明質(zhì)酸菌株，本研究的目的就是優(yōu)化該菌株的營養(yǎng)及培養(yǎng)環(huán)境條件。通過搖瓶階段碳源、氮源等的選擇，優(yōu)化發(fā)酵

2、培養(yǎng)基；以工業(yè)化為目標(biāo)，進(jìn)行了發(fā)酵生產(chǎn)透明質(zhì)酸從實(shí)驗(yàn)室規(guī)模到7L小試，再到1500L中試規(guī)模放大試驗(yàn)，考察了營養(yǎng)條件及環(huán)境條件對獸疫鏈球菌WSH24合成透明質(zhì)酸的影響。主要研究結(jié)果如下： 1.對菌株WSH24的發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行了優(yōu)化。通過實(shí)驗(yàn)選擇了合適的碳源、氮源及對透明質(zhì)酸合成有重大影響的金屬離子和環(huán)境條件，確定了發(fā)酵培養(yǎng)基的配方及發(fā)酵環(huán)境條件。發(fā)酵培養(yǎng)基配方為(g/L)：葡萄糖50，蛋白胨10，酵母粉10，MgSO4·7H2

3、O2。發(fā)酵初始pH值為7.0，培養(yǎng)溫度為37℃。2.搖瓶階段發(fā)酵條件優(yōu)化后進(jìn)行了7L發(fā)酵罐的小試。7L發(fā)酵罐的小試發(fā)現(xiàn)供氧是發(fā)酵過程的關(guān)鍵因素。1.2vvm的通氣量和200rpm的攪拌速率，能夠滿足獸疫鏈球菌WSH24發(fā)酵產(chǎn)透明質(zhì)酸對氧的需求，透明質(zhì)酸最高產(chǎn)量達(dá)到5.3g/L，分子量最高達(dá)到1.88×106Da。 3.研究了7L發(fā)酵罐中初糖濃度及氮源濃度對透明質(zhì)酸產(chǎn)量及分子量的影響，初始葡萄糖濃度為65.8g/L、酵母粉濃度為