Walker256腫瘤18F-FLT攝取與腫瘤細(xì)胞增殖活性的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：
　　判斷抗腫瘤治療效果的傳統(tǒng)方法是檢測(cè)治療所引起的腫瘤大小的變化，通常通過(guò)超聲、CT和MR測(cè)量實(shí)質(zhì)性腫瘤的大小，此過(guò)程一般需要較長(zhǎng)時(shí)間（一般平均為幾個(gè)月），對(duì)于一些難治性腫瘤，早期評(píng)價(jià)治療反應(yīng)可以在腫瘤大小改變之前調(diào)整治療方案，避免不必要的毒性及經(jīng)濟(jì)上的浪費(fèi)。
　　惡性腫瘤一個(gè)重要的生物學(xué)特征是腫瘤細(xì)胞的增殖活性，因此腫瘤細(xì)胞增殖活性檢測(cè)評(píng)價(jià)腫瘤細(xì)胞對(duì)治療的反應(yīng)具有重要的意義。近年來(lái)，隨著PET-CT在臨床應(yīng)用的開(kāi)展

2、，應(yīng)用正電子藥物對(duì)腫瘤治療效果（尤其是治療后早期療效）評(píng)價(jià)成為可能。目前臨床應(yīng)用最為廣泛的正電子顯像劑是18F-FDG，由于其可以反應(yīng)器官及組織的葡萄糖代謝，臨床廣泛應(yīng)用于腫瘤的診斷、分期、療效判斷及復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)，但18F-FDG特異性較差。18F-FLT作為嘧啶類(lèi)似物引起了較廣泛的關(guān)注，作為嘧啶類(lèi)似物18F-FLT可以反映DNA的復(fù)制，因此可以反映腫瘤細(xì)胞的增殖狀態(tài)，但是其作用機(jī)理及對(duì)腫瘤的診斷意義還沒(méi)有完全清楚，對(duì)于不同的腫瘤及不同的治

3、療方式所得結(jié)果也不盡相同，另外，18F-FLT與胸腺嘧啶核苷的動(dòng)力學(xué)差異還沒(méi)有象18F-FDG與葡萄糖之間的關(guān)系一樣完全研究清楚，因此還需要更多的研究來(lái)探索18F-FLT在腫瘤診斷及療效評(píng)價(jià)的價(jià)值。本實(shí)驗(yàn)將進(jìn)一步研究18F-FLT合成及在腫瘤大鼠體內(nèi)的分布，并進(jìn)一步應(yīng)用不同治療方法（放療、化療及聯(lián)合放化療）評(píng)價(jià)治療后早期18F-FLT攝取的變化及其與腫瘤細(xì)胞增殖活性之間的相關(guān)性。
　　方法：
　　論文一、18F-FLT合成方

4、法改進(jìn)及荷Walker256腫瘤Wistar大鼠18F-FLT與18F-FDG體內(nèi)分布的對(duì)比研究
　　1、18F-FLT合成：應(yīng)用BOC前體及套藥，GE MINItrace回旋加速器及GE TRACERlab FX FN全自動(dòng)化學(xué)合成儀進(jìn)行18F-FLT合成，粗產(chǎn)品經(jīng)過(guò)Sep-Pak Plus C18柱過(guò)濾提純。
　　2、應(yīng)用回旋加速器及合成器合成18F-FDG。
　　3、建立Wistar大鼠Walker256腫瘤模型

5、（14只）。
　　4、應(yīng)用GE公司Discovery ST16PET-CT進(jìn)行荷Walker256腫瘤Wister大鼠18F-FLT與18F-FDG顯像。
　　5、定量分析Walker256腫瘤Wister大鼠18F-FLT與18F-FDG體內(nèi)分布，分別計(jì)算不同組織每克組織攝取注射劑量的百分比(％ID/g)并半定量腫瘤與非腫瘤放射性比值(T/M)。
　　論文二、Wistar大鼠Walker256腫瘤放化療早期18F-F

6、LT、18F-FDG攝取與腫瘤細(xì)胞增殖活性的相關(guān)性研究
　　1、建立Wistar大鼠Walker256腫瘤模型（70只）。
　　2、Wistar大鼠分組：隨機(jī)分為4組（化療組20只，放療組20只，放化療組20只，對(duì)照組10只），分組后分別進(jìn)行放療、化療及放化療聯(lián)合治療。
　　3、PET-CT顯像
　　應(yīng)用PET-CT分別對(duì)治療前、放療、化療及放化療聯(lián)合治療后24小時(shí)及48小時(shí)荷瘤大鼠18F-FLT與18F-FDG

7、顯像。定量分析治療前后18F-FLT與18F-FDG腫瘤攝取變化(分別計(jì)算腫瘤非腫瘤比值(T/M)及每克腫瘤組織攝取注射劑量的百分比(％ID/g)，統(tǒng)計(jì)分析不同治療前后腫瘤攝取的變化以及T/M與％ID/g的相關(guān)性。
　　4、結(jié)果分析
　　對(duì)不同治療方式大鼠腫瘤進(jìn)行免疫組化分析，測(cè)定腫瘤組織PCNA及Ki-67陽(yáng)性指數(shù)，統(tǒng)計(jì)分析其治療前后變化及與18F-FLT、18F-FDG攝取之間的相關(guān)性。
　　結(jié)果：
　　論文

8、一、荷Walker256腫瘤Wistar大鼠18F-FLT與18F-FDG體內(nèi)分布的對(duì)比研究
　　1、藥物合成結(jié)果：
　　18F-FLT粗產(chǎn)品合成后應(yīng)用固相分離柱所得18F-FLT，產(chǎn)品放化純＞90％，雜質(zhì)含量＜5％。
　　2、荷Walker256腫瘤Wister大鼠18F-FLT與18F-FDG體內(nèi)分布特點(diǎn)：
　　18F-FDG在大鼠體內(nèi)生物分布：18F-FDG在腫瘤組織中明顯濃聚，T/M比值高（6.817±0

9、.784），在心臟有較高的放射性分布，而在肝臟放射性分布較低。18F-FLT在腫瘤組織中輕度濃聚，T/M比值較18F-FDG組低（2.111±0.178），在心臟放射性分布明顯低于18F-FDG，在骨髓有較高的放射性分布。
　　3、腫瘤組織％ID/g與PET-CT測(cè)定T/M比值之間相關(guān)性良好(FDG與FLT組r分別為0.890和0.838)。
　　論文二、Wistar大鼠Walker256腫瘤放化療早期18F-FLT、18F

10、-FDG攝取與腫瘤細(xì)胞增殖活性的相關(guān)性研究
　　1、PET-CT顯像結(jié)果：
　　(1)化療、放療及放化療后24小時(shí)及48小時(shí)大鼠腫瘤部位18F-FLT放射性分布較對(duì)照組降低，T/M比值較對(duì)照組降低(P＜0.01)。
　　(2)化療后24小時(shí)及48小時(shí)大鼠腫瘤18F-FDG放射性分布較對(duì)照組降低，T/M比值較對(duì)照組降低(P＜0.05)。放療及放化療聯(lián)合治療后24小時(shí)及48小時(shí)腫瘤18F-FDG放射性分布較對(duì)照組略降低，T

11、/M比值較對(duì)照組略降低(P＞0.05)。
　　2、免疫組化結(jié)果
　　(1)PCNA：與對(duì)照組相比，LI-PCNA在放療、化療及放化療后24小時(shí)及48小時(shí)明顯降低(p＜0.001)。放、化療后PCNA陽(yáng)性細(xì)胞比率明顯降低，而放化療聯(lián)合治療對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖活性的抑制作用更明顯。
　　(2)Ki-67：與對(duì)照組相比，LI-Ki-67化療、放療及放化療后24小時(shí)、48小時(shí)均明顯降低(p＜0.001)。放、化療后Ki-67陽(yáng)性細(xì)胞

12、比率明顯降低，而放化療聯(lián)合治療對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖活性的抑制作用更明顯。
　　3、腫瘤18F-FLT、18F-FDG攝取與LI-PCNA及LI-Ki67相關(guān)性分析。
　　(1)放、化療及聯(lián)合放化療前后18F-FLT攝取(T/M)與LI-PCNA及LI-Ki67均呈正相關(guān)（r分別為0.848和0.899）。
　　(2)化療后18F-FDG攝取(T/M)與LI-PCNA及LI-Ki67正相關(guān)（r分別為0.842和0.813），而

13、放療后18F-FDG攝取(T/M)與LI-PCNA及LI-Ki67無(wú)正相關(guān)（r分別為0.390和0.379），放化療聯(lián)合治療后18F-FDG攝取(T/M)與LI-PCNA及LI-Ki6呈弱正相關(guān)（r分別為0.670和0.677）。
　　4、FLT組及FDG組T/M與％ID/g之間相關(guān)性
　　T/M與％ID/g之間有良好的相關(guān)性（r分別為0.898和0.843）。
　　結(jié)論：
　　1、采用固相分離柱對(duì)18F-FLT

14、合成后的粗產(chǎn)品進(jìn)行分離，所得產(chǎn)物符合18F-FLT的產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)，本分離方法簡(jiǎn)便，有效地解決了18F-FLT合成產(chǎn)率低，合成成功率低等難題，為臨床18F-FLT的合成及進(jìn)一步基礎(chǔ)及臨床研究奠定了基礎(chǔ)。
　　2、18F-FLT在Walker256腫瘤中有較高的濃聚(T/M值為2.111±0.178;％ID/g值為0.337±0.035)，此種腫瘤可以作為進(jìn)一步研究18F-FLT特性的腫瘤模型。
　　3、PET-CT顯像測(cè)定腫瘤攝取

15、T/M與腫瘤組織實(shí)際攝?。D/g之間有良好的相關(guān)性，表明通過(guò)PET-CT顯像所得T/M可以真實(shí)反映腫瘤組織的實(shí)際攝取，為體外無(wú)創(chuàng)檢測(cè)腫瘤細(xì)胞增殖的良好指標(biāo)。
　　4、無(wú)論是化療、放療還是聯(lián)合治療后早期，18F-FLT攝取與腫瘤細(xì)胞增殖活性都呈正相關(guān)，18F-FLT具有較高的腫瘤特異性，是評(píng)價(jià)腫瘤治療后早期反應(yīng)，尤其是放射治療后早期細(xì)胞增殖變化的靈敏的正電子顯像劑。18F-FDG攝取與腫瘤化療后腫瘤細(xì)胞增殖相關(guān)，而與放療及放化療聯(lián)