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文檔簡介
1、目的:
1.觀察低強度超聲對早孕藥流子宮的收縮作用,分析其對子宮復舊的影響。
2.探討低強度超聲促進早孕大鼠藥物流產(chǎn)后子宮復舊的可能機制,為低強度超聲促進產(chǎn)后子宮復舊提供理論依據(jù)。
方法:
1.隨機選擇3月齡以內(nèi)的雌性普通級遠交群大鼠(SpragueDawley,SD)55只,雄性普通級SD大鼠5只,按照雌雄2∶1的比例夜晚(20:00)合籠,12小時后(次日8:00)觀察陰道栓,然后進行陰道涂片
2、于顯微鏡下觀察精子。以顯微鏡發(fā)現(xiàn)精子或明確查見陰道栓的當天為妊娠第1天。若未發(fā)現(xiàn),雌雄大鼠分籠喂養(yǎng)7天后,按前法再次合籠至妊娠,妊娠第7天,依次灌胃米非司酮16.6mg/kg(8:00)與米索前列醇0.1 mg/kg(18:00),建立30只大鼠早孕藥物完全流產(chǎn)模型。
2.將建模成功的30只大鼠采用完全隨機分組法分組到超聲輻照組和假輻照組各15只,超聲輻照組:藥流后第一天開始,使用超聲波子宮復舊儀照射子宮覆蓋區(qū)域(聲強=2W/
3、cm2,頻率=0.8MHz)。每日1次,每次30分鐘,連續(xù)5天;假輻照組:從藥流后第一天開始使用超聲波子宮復舊儀照射子宮覆蓋區(qū)域(聲強=0W/cm2,頻率=0MHz)。每日1次,每次30分鐘,連續(xù)5天。
3.孕囊排出后,用眼科鑷于大鼠陰道內(nèi)置入定量棉球一個,每2~6小時取出血棉,檢測其出血量,并記錄出血時間。
4.治療完成后次日,取大鼠左側(cè)子宮組織黃豆大小3塊,采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)、化學檢測法、免疫組織化
4、學法(IHC)分別檢測內(nèi)皮素-1(endothelin-1,ET-1)、一氧化氮(nitrogen monoxide,NO)和縮宮素受體(oxytocin receptor,OTR)。
結(jié)果:
1.受孕成功率為41.7%(40/96)。三種檢查方法,靈敏度陰栓+精子檢查(0.9000)最高,與精子檢查(0.8750)相差不大,陰栓檢查靈敏度(0.7000)最低,特異度三種方法相差不大;陰栓檢查假陰性率高達30.00%
5、,與精子檢查(12.50%)和聯(lián)合檢查相比(10.00%)差異均有統(tǒng)計學意義(*P<0.05),三種檢測受孕方法比較假陽性率無顯著性差異(P>0.05)。藥物流產(chǎn)成功率為88.24%(30/34)。
2.肉眼觀:假輻照組,子宮已不見孕囊窩,但較正常大鼠子宮粗約2mm~3mm,表面充血明顯,呈櫻紅色;超聲輻照組,大鼠子宮大體觀已基本恢復至未孕狀態(tài)。病理:超聲輻照組,子宮肌纖維細長,排列規(guī)則,內(nèi)環(huán)外縱;假輻照組,子宮肌纖維輕度增生
6、肥大,排列稍紊亂,子宮肌層整體較超聲輻照組厚,子宮腔較大。
3.陰道出血量、出血時間的比較,超聲輻照組的大鼠陰道出血量明顯少于假輻照組,差異有統(tǒng)計學意義(*P<0.05);但陰道出血時間超聲輻照組和假輻照組之間沒有顯著性差異(P>0.05)
4.超聲輻照組的大鼠子宮組織勻漿中ET-1的含量明顯高于假輻照組,具有顯著的統(tǒng)計學意義(*P<0.05),而超聲輻照組大鼠子宮勻漿中NO的含量較低,但沒有明顯的統(tǒng)計學意義(P>0
7、.05)。
5.超聲輻照組OTR表達多為強陽性,假輻照組OTR表達多數(shù)為弱陽性;無論子宮肌層還是內(nèi)膜層超聲輻照組強陽性表達率均高于假輻照組,且差異均有顯著統(tǒng)計學意義(*P<0.05)。
結(jié)論:
1.精子檢查法操作簡便,方法易于掌握,靈敏度高,為最佳的判斷大鼠雌鼠受孕的方法;米非司酮16.6mg/kg+米索前列醇0.1mg/kg劑量組建立完全藥流模型成功率高,可有效的運用于大鼠完全流產(chǎn)模型的建立。
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