一種新型脊髓壓迫動物模型的建立及自噬因子beclin1表達研究.pdf

1、目的：
　　1、建立一種新型的脊髓壓迫動物模型；
　　2、通過beclin-1等因子的變化趨勢探討自噬在脊髓受壓后的發(fā)展過程及規(guī)律；
　　3、研究動物脊髓受壓后的影像學、病理學變化。
　　方法：
　　將一種吸水后可以發(fā)生體積膨脹的材料植入SD大鼠的C6-C7硬膜外間隙。從而對SD大鼠脊髓造成壓迫，但是不造成運動功能障礙。建立一種脊髓受壓但是無運動功能障礙的新型脊髓壓迫動物模型。將30只體重為200g-250

2、gSD大鼠隨機分為對照組及實驗組。首先通過后路手術(shù)暴露SD大鼠頸椎椎板，然后將吸水膨脹材料植入大鼠C6-C7硬膜外間隙。對照組SD大鼠行假手術(shù)，即不植入吸水膨脹材料。術(shù)后待SD大鼠清醒后觀察其運動功能，如果出現(xiàn)四肢痙攣、無力、四肢運動不協(xié)調(diào)等運動功能障礙表現(xiàn)時即表明手術(shù)對實驗動物造成急性損傷，隨即淘汰該實驗動物并進行樣本補充。術(shù)后1天、3天、7天、10天、14天分別處死實驗組及對照組SD大鼠各3只，進行運動行為學（BBB評分）、MRI、

3、HE、TUNEL染色及Beclin-1免疫組織化學染色檢測。觀察上述指標在不同時間段的變化趨勢。統(tǒng)計學方法：計量資料采用樣本均數(shù)±標準差表示。符合正態(tài)分布的計量資料采用配對T檢驗，實驗組及對照組組內(nèi)采用SNK-q檢驗，P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果：
　　術(shù)后各時間點進行MRI檢查,結(jié)果表明吸水膨脹材料進入C6-C7硬膜外間隙，無脫出及滑移，并造成椎管內(nèi)脊髓壓迫。術(shù)后實驗組及對照組動物在各個時間點未出現(xiàn)運動功

4、能障礙。HE染色顯示實驗組受壓節(jié)段脊髓出現(xiàn)明顯壓跡，神經(jīng)元細胞變性、空泡樣變。TUNEL凋亡檢測發(fā)現(xiàn)從造模后1天開始出現(xiàn)陽性細胞，對照組相應(yīng)節(jié)段脊髓則未出現(xiàn)相應(yīng)變化。Beclin-1免疫組化染色檢測表明:造模后對照組 Beclin1陽性細胞有少量表達。實驗組Beclin-1陽性細胞于造模后第1天開始升高，第7天達到峰值，造模后第14天表達量與對照組無統(tǒng)計學差異（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　本實驗所建立的脊髓壓迫動物模型