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文檔簡介
1、目的:
本課題旨在探索兔頸動脈粥樣硬化模型的復(fù)制;研究何首烏游離蒽醌對兔頸動脈粥樣硬化斑塊消除的療效;研究何首烏游離蒽醌通過干預(yù)炎癥因子C反應(yīng)蛋白(c-reactive protein,CRP)進(jìn)而對動脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)的影響。
方法:
40只新西蘭大白兔,3月齡,雄性,隨機(jī)分為6組,分別為模型組10只,高劑量干預(yù)組6只、中劑量干預(yù)組6只、低劑量干預(yù)組6只、陽性對照組6只和正
2、常組6只。
實(shí)驗(yàn)動物除正常組外,用免疫注射法加高脂飼料喂養(yǎng)法進(jìn)行兔頸動脈粥樣硬化模型的復(fù)制,全部從兔耳緣靜脈注射牛血清白蛋白,免疫劑量為250mg·kg-1,1次/周,連續(xù)3周。在免疫注射當(dāng)天,同時(shí)開始喂食高脂飼料,高脂飼料配方為15%蛋黃、5%豬油、0.5%膽固醇、0.5%脫氧膽酸鈉、0.5%丙硫氧嘧啶、0.5%維生素D3和78%基礎(chǔ)飼料均勻混合而成。
第16周通過解剖動物,肉眼觀察斑塊出現(xiàn)及病理切片HE染色確定兔
3、頸動脈粥樣硬化模型復(fù)制成功以后,給予高中低劑量干預(yù)組不同劑量(由高到低分別是15mg·kg-1、7.5mg·kg-1、3.75mg·kg-1)的何首烏游離蒽醌進(jìn)行治療,陽性對照組給予血脂康膠囊進(jìn)行治療。給藥4周后,從心臟用靜脈穿刺針配合一次性真空采血管取血,用于血清指標(biāo)的檢測,血清用于檢測甘油三酯(Triglyceride,TG)、總膽固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白膽固醇(Low densitylipop
4、rotein cholesterol,LDL-C)以及C反應(yīng)蛋白等。處死全部實(shí)驗(yàn)動物,暴露頸部、胸部和腹部。觀察頸動脈標(biāo)本,采集左右兩側(cè)頸總動脈,放入4%多聚甲醛固定,用于HE染色;部分胸主動脈、腹主動脈,置于-80℃的液氮中保存,這些動物組織用于提取組織RNA,用于實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測CRP。
結(jié)果:
1、模型組16周,肉眼見頸動脈表面凹凸不平,管壁內(nèi)有淡白色或淡黃色突起,并伴有脂紋形成,符合頸動脈粥樣硬化的病理
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