碳酸酐酶4基因?qū)﹄u成纖維細(xì)胞培養(yǎng)液酸堿環(huán)境的影響.pdf

1、碳酸酐酶4(Carbonic Anhydrase4，CA4)是碳酸酐酶家族成員之一，催化二氧化碳與水反應(yīng)生成碳酸氫根與氫離子的可逆反應(yīng)，主要影響細(xì)胞環(huán)境中的pH值。目前，基于CA4的研究主要集中在肺、骨骼肌和癌癥中，對(duì)生殖發(fā)育方面的研究較少。研究表明，CA4在雞貯精腺上皮細(xì)胞中有表達(dá)，并且在子宮陰道交接部表達(dá)量高，提示CA4對(duì)雌性家禽貯精腺酸堿環(huán)境具有調(diào)控作用。
　　本研究以雞胚成纖維細(xì)胞(DF-1)為模型，利用RNAi方法，通過

2、細(xì)胞培養(yǎng)、免疫熒光、免疫組化、qRT-PCR等技術(shù)研究CA4對(duì)DF-1細(xì)胞培養(yǎng)液pH和左旋乳酸的作用。主要研究結(jié)果如下:
　　(1)篩查雞CA4基因外顯子區(qū)段上存在的SNP位點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)6個(gè)SNP位點(diǎn)，其中有4個(gè)SNP的密碼子變化引起了氨基酸的變化。第620位堿基發(fā)生C/T突變，該位點(diǎn)突變引起脯氨酸突變?yōu)榱涟彼?，?21位堿基發(fā)生T/A突變，該位點(diǎn)突變使色氨酸突變?yōu)榫彼?，?96位堿基發(fā)生A/T突變，該位點(diǎn)突變導(dǎo)致編碼的賴氨酸突變?yōu)?/p>