姜黃素對(duì)外源性一氧化氮所致小鼠胃排空減弱的作用及機(jī)制.pdf

1、目的：姜黃素是從姜黃的干燥根莖中提取的具有多種生物活性的成分，具有抗炎、抗氧化、清除自由基、降血糖、保護(hù)心血管和抗腫瘤等多種生物學(xué)活性。一氧化氮（nitric oxide,NO）作為非腎上腺素能非膽堿能抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，可以抑制胃腸平滑肌；乙酰膽堿（acetylcholine,Ach）作為胃腸道中的興奮性神經(jīng)遞質(zhì)可以促進(jìn)胃腸平滑肌運(yùn)動(dòng)，二者在胃腸運(yùn)動(dòng)的過(guò)程中，發(fā)揮不可替代的調(diào)控作用。因此本實(shí)驗(yàn)分別從NO和Ach途徑來(lái)探討姜黃素促進(jìn)胃腸蠕動(dòng)

2、的相關(guān)機(jī)制。通過(guò)給予一氧化氮（NO）前體—L-精氨酸后在體內(nèi)產(chǎn)生NO復(fù)制小鼠胃腸蠕動(dòng)減慢模型，觀察并比較姜黃素灌胃對(duì)NO所致小鼠胃排空的影響，并進(jìn)一步檢測(cè)姜黃素改善小鼠胃排空作用是否與影響胃組織NO和Ach有關(guān)，探討姜黃素的作用機(jī)制。
　　方法：昆明種雄性小鼠36只，隨機(jī)分為對(duì)照組、姜黃素組、L-精氨酸組、姜黃素+L-精氨酸聯(lián)合用藥組（聯(lián)合組），每組9只，共四組。姜黃素組給予姜黃素溶液（200mg/kg/d）灌胃，對(duì)照組給予阿拉伯

3、膠溶液灌胃,每天一次，共15天。L-精氨酸組先給予溶媒溶液灌胃，聯(lián)合組先給予姜黃素溶液（200mg/kg/d）灌胃，每天一次，共15天。從灌胃的第11天開(kāi)始，L-精氨酸組、聯(lián)合組小鼠分別給予0.2mlL-精氨酸(2g/kg)混懸液灌胃。末次用藥后禁食24h，用亞甲藍(lán)灌胃法檢測(cè)各組小鼠胃排空率，并取新鮮胃組織測(cè)定NO含量、一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）活性以及乙酰膽堿酯酶（Acetylcholine,A

4、chE）變化。運(yùn)用熒光定量PCR進(jìn)一步檢測(cè)AchE mRNA表達(dá)和免疫熒光檢測(cè)AchE蛋白質(zhì)表達(dá)的變化。應(yīng)用SPSS17.0軟件對(duì)各組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，數(shù)據(jù)間比較采用方差齊性檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)、析因設(shè)計(jì)方差分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：與對(duì)照組比較，L-精氨酸組小鼠胃排空率明顯降低(F=10.20，P＜0.01)，與L-精氨酸組比較，聯(lián)合組小鼠胃排空率升高(F=6.39,P＜0.05)。與對(duì)照組比較，L-精氨酸組小

5、鼠胃組織NO含量明顯升高(F=10.67，P＜0.01)；與L-精氨酸組比較，聯(lián)合組小鼠胃組織 NO含量減少(F=18.47，P＜0.01)。與對(duì)照組比較，L-精氨酸組小鼠胃組織總一氧化氮合酶（total nitric oxide synthase,TNOS）和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）的活性顯著升高（F=23.92，P＜0.01；F=6.84，P＜0.05）；與 L-

6、精氨酸組比較，聯(lián)合組小鼠胃組織 TNOS活性（F=17.93，P＜0.01）和iNOS(F=5.18，P＜0.05)活性顯著下降。與對(duì)照組比較，L-精氨酸組小鼠胃組織AchE活性下降（P＜0.01），mRNA和蛋白表達(dá)量降低（P＜0.01）；與L-精氨酸組比較，聯(lián)合組小鼠胃組織AchE活性升高，AchE mRNA和蛋白表達(dá)量增加（P＜0.01）。單用姜黃素組與對(duì)照組比較，上述指標(biāo)無(wú)顯著性變化，與對(duì)照組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。<