森林革蜱雌蜱唾液腺結構、蛋白成分及其變化分析.pdf

1、蜱類是專性吸血的外寄生節(jié)肢動物，傳播多種人、畜疾病，給人類健康和畜牧業(yè)發(fā)展帶來極大危害。唾液腺是蜱體內的一個重要器官，在其生命活動中起重要作用。它不僅能維持體內離子、水分平衡，使蜱成功吸血，而且又是各類疾病傳播的窗口。因此，對其研究具有重要的理論和實踐意義。 本文以廣泛分布于我國北方的森林革蜱DermacentorsilvarumOlenev雌蜱為研究對象，利用掃描電鏡、透射電鏡、Bradford法、SDS-PAGE等現代生物學

2、技術對不同發(fā)育期唾液腺形態(tài)和超微結構、蛋白含量和成分的動態(tài)變化等方面進行了較為系統(tǒng)的研究，并對雌蜱唾液蛋白成分進行了初步分析，填補了該領域中的不足，為深入開展蜱類唾液腺研究提供了依據。主要研究結果如下： 1.雌蜱唾液腺由腺管和大量的腺泡組成。唾液腺管逐級分支，由中央腺管、主分支腺管和小葉分支腺管構成；依據腺泡分布位置的不同，可分為Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型腺泡，分別位于中央腺管、中央腺管與主分支腺管、小葉分支腺管上。 雌蜱唾液腺隨

3、發(fā)育期而發(fā)生明顯變化。饑餓雌蜱唾液腺腺泡小(41.75μm)，表面有大量的突起和凹陷；吸血后3d腺體和腺泡明顯增大；交配期腺泡達到最大值(88.04μm)，約為饑餓期的2.1倍，腺泡表面明顯變得光滑；飽血后腺泡逐漸萎縮，發(fā)生自溶現象，飽血后2d唾液腺明顯退化。 2.雌蜱唾液腺Ⅲ型腺泡在結構上主要由e細胞、d細胞、不發(fā)達的f細胞和膜間質細胞(近腔間質細胞和遠腔間質細胞)所組成。d細胞分布于腺管附近；e細胞與d細胞交叉位于腺管附近，

4、且也分布于d細胞和f細胞間；f細胞與腺管相對，位于腺泡底部。 d細胞中含有大量的分泌性復合顆粒，顆粒由可見的亞顆粒單位組成，且在復合顆粒中間密布有大量粗面內質網和核糖體；e細胞含有大個的異質性中等密度的顆粒，直徑可達6μm；f細胞，在饑餓狀態(tài)時，細胞內富含核糖體但沒有異質性分泌顆粒。但附著后，該細胞立即變大，產生大量的顆粒內質網繼而形成大而高密度的分泌顆粒，并且可見顯著的高爾基體。 3.唾液腺蛋白含量在不同發(fā)育期發(fā)生變化

5、，并與腺體結構變化趨勢基本一致。饑餓期蛋白含量低(16.02μg/tick)；吸血3d蛋白含量急劇增加(79.56μg.tick)；交配期達到峰值(108.90μg/tick)，約為饑餓期的6.8倍；飽血后蛋白含量明顯下降，飽血當天和飽血后2d的含量分別為92.78μg/tick和80.64μg/tick。 4.饑餓雌蜱唾液腺有20條蛋白帶；吸血3d增至29條；交配后達到33條，飽血當天減至30條，吸血和交配均能刺激新蛋白的合成

6、。各發(fā)育期唾液腺蛋白主帶中有11條，分子量分別為168kD、106kD、90kD、78kD、56kD、51kD、37kD、35kD、26kD、23kD、15kD，在不同發(fā)育期發(fā)生增加、缺失和量的變化。 5.本研究中初步建立了較成熟的蜱類唾液收集技術。對雌蜱唾液分析結果顯示：交配期雌蜱唾液蛋白帶紋清晰，結果顯示共9條蛋白帶紋，分子量分別為167kD、106kD、69kD、40kD、37kD、35kD、33kD、24kD、13kD。