醫(yī)院內(nèi)感染肺炎克雷伯菌的耐藥性及脈沖場電泳分析.pdf

1、目的:
　　 伴隨著多種新型診療技術(shù)的發(fā)展，醫(yī)院感染也在不斷增加，產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌已成為院內(nèi)感染主要的病原菌之一。ESBLs能夠水解三代頭孢菌素及單環(huán)β-內(nèi)酰胺類抗生素，表現(xiàn)出對多種抗菌藥物耐藥，容易引起院內(nèi)感染的暴發(fā)流行。盡早查明感染源及其流行特點和趨勢可以有效地控制感染的流行。目前公認的鑒定傳染源的主要方法是對細菌進行基因分型和同源性分析。但是，迄今有關(guān)細菌的分型還沒有一個統(tǒng)一的標準，脈沖場電泳

2、分型方法(PFGE)是美國疾病控制中心(CDC)推薦的基因分型方法。本文應用PFGE方法，對中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院第二新生兒內(nèi)病房64株肺炎克雷伯菌進行了基因分型和同源性分析。對其流行特點進行了探討。
　　 方法及結(jié)果:
　　 1.ESBLs檢測
　　 按照NCCLS/CLSI推薦的確診試驗方法進行操作，用頭孢他啶(CAZ，30μg/片)和頭孢他啶加克拉維酸(CAZ/CLV，30μg/10μg);頭孢噻肟(CT

3、X，30μg/片)和頭孢噻肟加克拉維酸(CTX/CLV，30μg/10μg);分別測量兩種紙片單獨及加克拉維酸的抑菌環(huán)直徑，加克拉維酸與不加克拉維酸的抑菌環(huán)直徑比較≥5mm可確認為ESBLs菌株。質(zhì)控菌株:肺炎克雷伯氏菌ATCC700603(CAZ/CLV:CAZ≥5mm)。64株菌中有58株陽性。
　　 2.藥敏分析
　　 使用紙片擴散法，用常見的26種抗生素紙片對從第二新生兒內(nèi)病房中分離的58株產(chǎn)ESBLs院內(nèi)感染肺

4、炎克雷伯菌進行藥敏檢測，操作及結(jié)果判斷參照NCCLS/CLSI2010年標準。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，這些菌株對阿米卡星，四環(huán)素，環(huán)丙沙星，頭孢西丁較敏感;對亞胺培南，美羅培南敏感率達100％;對氨曲南，氨芐西林，哌拉西林，頭孢克洛，頭孢吡肟，頭孢哌酮，頭孢噻肟，頭孢喹啉，頭孢他啶，頭孢呋辛基本耐藥，對其他抗生素有不同程度的耐藥。
　　 3.PFGE分型
　　 58株產(chǎn)ESBLs菌株經(jīng)Xba I酶切后共產(chǎn)生30條大小不同的片段（圖3）

5、，根據(jù)帶型的不同可以分為A、B、C、D、E、F、G、H、I、J、K、L、M、N共14個類型。其中A型為流行菌株，共21株，包含5個亞型，A1型有17株，A2，A3，A4，A5各一株。B型兩個亞型，B1包含7株，B2包含1株。C型為1株。D型有D1和D2兩個亞型，D1有6株，D2有1株。剩余各型分別為E型4株，F(xiàn)型2株，G型2株，H型3株，I型2株，J型6株，K、L、M、N型各1株。
　　 4.流行病學分析
　　 2010

6、年下半年-2011年12上半年第二新生兒內(nèi)病房出現(xiàn)了A1亞型的肺炎克雷伯菌的流行。2011年8月、9月爆發(fā)了B1亞型的肺炎克雷伯菌的流行。2011年11月、12月爆發(fā)了D1亞型的肺炎克雷伯菌的流行。
　　 結(jié)論:
　　 1.在第二新生兒病房中產(chǎn)ESBLs的肺炎克雷伯菌比列較大，耐藥性嚴重，應引起重視。
　　 2.中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院第二新生兒病房存在著同源性的肺炎克雷伯菌株的流行。
　　 3.PFGE