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文檔簡介
1、女性癌癥患者中,因化療損傷卵巢而導致的過早閉經(jīng)以及不孕是很常見的現(xiàn)象。對于這些病人來說,化療前成熟卵子/胚胎或者卵巢組織冰凍保存是她們保存生育能力的主要選擇。但是,對于她們卵巢功能的長期保護,尤其是生育能力的保存,以上方法是有局限性的。青春前期的女性由于卵巢功能尚未成熟,所以無法進行成熟卵子或胚胎凍存;對于未婚的成年女性,胚胎凍存則需要捐獻者的精子,且卵子或胚胎凍存,都需要藥物促排卵操作,這個操作過程不僅耽誤癌癥的治療時間,同時也可能使
2、雌激素敏感性癌進一步發(fā)展。目前卵巢組織冰凍保存還處于實驗階段,且化療后再移植還存在引起癌癥復發(fā)的可能。因此,對于很多化療后獲得長期生存的不孕女性來說,尋找一種經(jīng)濟、持久、安全及可靠的方法來挽救他們的卵巢功能及生育能力是社會急需解決的一項大事。2009年Zou等首次從小鼠卵巢中分離得到雌性生殖干細胞,并證實了該干細胞在體內(nèi)可以形成卵子并產(chǎn)生后代,從而首次真正意義上的證實了哺乳動物卵巢中存在生殖干細胞。2012年White等在驗證了Zou等
3、實驗基礎上同時首次從育齡期婦女卵巢中分離得到女性生殖干細胞。以上實驗結(jié)果將為運用雌性生殖干細胞治療女性不孕甚至延緩卵巢衰老提供理論基礎。考慮到現(xiàn)實中已經(jīng)有成千上萬的年輕女性患者因化療而導致卵巢功能受損甚至不孕,本研究通過化療誘導雌性小鼠卵巢性不孕來模擬女性患者化療后卵巢性不孕,探討雌性不孕小鼠卵巢內(nèi)是否存在生殖干細胞以及用此干細胞移植能否挽救因化療導致的卵巢功能受損及不孕。我們成功的從化療后不孕小鼠卵巢內(nèi)分離得到了生殖干細胞,并通過RT
4、-PCR,免疫熒光,堿性磷酸酶染色以及核型分析等多方面鑒定該細胞的特性;功能方面,利用GFP慢病毒轉(zhuǎn)染干細胞并移植到化療不孕小鼠卵巢內(nèi),小鼠生育能力得到恢復并產(chǎn)生后代;通過PCR和Southern blot鑒定鼠尾基因組DNA中的GFP基因,證實了GFP轉(zhuǎn)基因鼠是來源于生殖干細胞分化后受精而產(chǎn)生的。本實驗首次證實了化療后不孕小鼠卵巢內(nèi)存在雌性生殖干細胞,且該干細胞卵巢移植后可以修復卵巢功能以及生育能力,這為臨床上化療后卵巢功能受損以及不
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