原花青素對(duì)順鉑誘導(dǎo)的HEi-OC1聽(tīng)細(xì)胞損傷的保護(hù)作用.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的：探討原花青素(OPC)對(duì)順鉑(DDP)引起的HEI-OC1聽(tīng)細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及機(jī)制。
　　方法：實(shí)驗(yàn)分為正常對(duì)照組，單加保護(hù)藥組，順鉑損傷組，順鉑損傷加藥保護(hù)組。正常組細(xì)胞不加入任何藥物，僅單純更換細(xì)胞培養(yǎng)液;單加保護(hù)藥組細(xì)胞，加入不同劑量(5umol，10umol/L)的原花青素，由DMEM稀釋?zhuān)饔?4h;順鉑損傷組細(xì)胞加入20umol/L濃度順鉑，由DMEM稀釋?zhuān)饔?4h;加藥保護(hù)組細(xì)胞預(yù)先加入不同濃度原花青素作用

2、12h，而后棄上清液，再加入20umol/L濃度順鉑作用24h。采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率改變并在光鏡下觀察。利用Hoechst33258染色在熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞凋亡情況。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HEI-OC1聽(tīng)細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)含量的改變。Real-time PCR檢測(cè)促凋亡因子bax、抗凋亡因子bcl-2 mRNA表達(dá)水平的變化。Western blotting檢測(cè)cleaved Caspase-3、Caspase-8凋亡蛋白表達(dá)水平的

3、改變。
　　結(jié)果：與順鉑損傷組相比，預(yù)先加入OPC組MTT檢測(cè)及光鏡下觀察到細(xì)胞的存活率升高;Hoechst33258染色顯示細(xì)胞凋亡率降低（p＜0.05）;細(xì)胞內(nèi)ROS含量顯著降低(p＜0.01);bax mRNA表達(dá)水平降低，bcl-2 mRNA表達(dá)水平升高（p＜0.05）;凋亡蛋白cleaved Caspase-3、Caspase-8表達(dá)明顯降低(p＜0.05)。
　　結(jié)論：OPC對(duì)順鉑誘導(dǎo)的HEI-OC1聽(tīng)細(xì)胞的凋亡

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