一：GKLF與食管癌分化的關(guān)系及其對(duì)分化相關(guān)基因Keratin 13的調(diào)控研究;二：P53和MDM2基因多態(tài)與食管癌遺傳易感性.pdf

1、一.細(xì)胞分化是一個(gè)基因選擇性表達(dá)的過(guò)程，不同類型細(xì)胞的增殖和分化是由特異性轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控的，在細(xì)胞癌變過(guò)程中基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)被打破，導(dǎo)致上皮細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。胃腸富集Krtippel樣因子(Gut-enriched Krüppel like factor,GKLF,KLF4)是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的一個(gè)鋅指轉(zhuǎn)錄因子。GKLF參與調(diào)控細(xì)胞生命活動(dòng)的許多重要過(guò)程，如細(xì)胞增殖、分化等。在多種人類腫瘤中，GKLF發(fā)生異常表達(dá)，其與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有著密切的

2、聯(lián)系。我室先前利用cDNA微陣列分析發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子GKLF在食管鱗癌中表達(dá)下調(diào)，但其在食管癌中異常表達(dá)與腫瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)系目前尚無(wú)相關(guān)研究報(bào)道。用組織芯片的方法，檢測(cè)了95例食管鱗癌及其配對(duì)的正常食管上皮組織中GKLF蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果表明：GKLF在食管鱗癌中表達(dá)明顯減低，并且其表達(dá)水平與食管癌分化程度相關(guān)。探討GKLF異常表達(dá)對(duì)食管癌分化影響的具體分子機(jī)制，發(fā)現(xiàn)GKLF能通過(guò)結(jié)合位于Keratin13基因轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游-399

3、bp至-411bp之間的GKLF結(jié)合位點(diǎn)激活Keratin 13的轉(zhuǎn)錄表達(dá)。在食管癌組織和細(xì)胞系中，GKLF與Keratin 13的表達(dá)水平具有一定的相關(guān)性，不但進(jìn)一步驗(yàn)證了GKLF對(duì)Keratin 13的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)，并且還提示GKLF可能在Keratin 13的表達(dá)調(diào)節(jié)中擔(dān)任著比較重要的角色。 結(jié)果揭示：GKLF可能通過(guò)調(diào)節(jié)一些食管上皮細(xì)胞中特異性分化相關(guān)基因的表達(dá)，而在食管上皮細(xì)胞由增殖進(jìn)入分化狀態(tài)的正常程序中擔(dān)任著重要的角色

4、，其在食管鱗癌中的異常表達(dá)可能是導(dǎo)致細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化及異常分化的原因之一。 二.P53信號(hào)傳導(dǎo)通路在保持基因組穩(wěn)定性和防止細(xì)胞突變或癌變方面擔(dān)任重要的角色，并且可能與腫瘤的易感性會(huì)有著非常密切的關(guān)系。實(shí)驗(yàn)探討P53和MDM2基因的兩個(gè)功能性單核苷酸多態(tài)，P53 72Arg>Pro和MDM2 309T>G，與食管鱗癌遺傳易感性之間的關(guān)系。我們應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction，PCR)和限制性片段長(zhǎng)度

5、多態(tài)性(restriction fragment length polymorphism，RFLP)和ARMS-PCR以及DNA測(cè)序等分析方法，進(jìn)行了包括758個(gè)食管癌病人和1420個(gè)正常對(duì)照的關(guān)聯(lián)研究，分析P53 72Arg>Pro和MDM2 309T>G基因型在病人和正常人中分布的差異以及這些基因型與食管癌風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系。 結(jié)果表明：攜帶P53 Pro/Pro基因型者發(fā)生食管癌的風(fēng)險(xiǎn)比攜P53 Arg/Arg基因型者高1.83倍

6、(95％CI，1.43-2.35；P<0.001)；攜帶MDM2 GG基因型者患食管癌的風(fēng)險(xiǎn)比攜帶MDM2 TT基因型者高1.49倍(95％CI，1.16-1.91：P=0.002)。而且，我們發(fā)現(xiàn)P53和MDM2基因的這兩個(gè)SNP之間有顯著的交互作用，既攜帶P53 Pro/Pro又?jǐn)y帶MDM2 GG基因型的個(gè)體，發(fā)生食管癌的風(fēng)險(xiǎn)度比攜帶P53 Arg/Arg和MDM2 TT基因型的個(gè)體高3.10倍(95％CI，2.07-4.69)。這

7、種高于相乘的基因-基因交互作用表明這兩個(gè)危險(xiǎn)因素處于導(dǎo)致疾病發(fā)生的同一條通路。并且這兩個(gè)多態(tài)導(dǎo)致食管癌風(fēng)險(xiǎn)增高與吸煙有協(xié)同作用，其中攜帶MDM2GG和P53 Pro/Pro基因型吸煙者發(fā)生食管癌風(fēng)險(xiǎn)最高(OR，5.29；95％CI，2.91-9.61)，是攜帶相應(yīng)基因型不吸煙者發(fā)生食管癌風(fēng)險(xiǎn)(OR，2.18；95％CI，1.18-4.01)的2到3倍。另外，我們還發(fā)現(xiàn)攜帶MDM2 GG基因型者患低分化進(jìn)展期食管癌風(fēng)險(xiǎn)增高，MDM2GG基