蕙蘭（Cymbidium faberi Rolfe）離體快繁及四倍體培育研究.pdf

1、本文對蕙蘭組織培養(yǎng)中多倍體誘導(dǎo)進行了研究，以期為蕙蘭新品種的選育奠定基礎(chǔ)。 蕙蘭離體再生體系的研究結(jié)果表明：最佳外植體消毒方式是以洗滌劑浸泡10 min，自來水沖洗30 min，75％乙醇消毒60 s，0.1％升汞消毒10 min(加數(shù)滴吐溫-20)，無菌水沖洗4～6次為宜。初代誘導(dǎo)芽分化的適宜培養(yǎng)基為MS+1.5 mg/L6-BA+0.2 mg/LNAA，誘導(dǎo)率達93.3％；其繼代增殖的適宜培養(yǎng)基為MS+1.0 mg/L6-B

2、A+0.1 mg/LNAA，增殖系數(shù)為4.8：適宜的生根培養(yǎng)基為MS，植株和根系生長狀況良好，生根率為100％，移栽成活率為85％。 在建立離體再生體系基礎(chǔ)上，利用秋水仙素溶液為誘變劑，采用浸泡法和混培法對蕙蘭進行多倍體誘導(dǎo)，結(jié)果表明：兩種方法中以浸泡法處理效果較好，以0.5％秋水仙素溶液浸泡處理48 h為佳，誘變產(chǎn)生的植株經(jīng)染色體鑒定，其染色體數(shù)目為2n=4x=88，屬四倍體類型，誘導(dǎo)率高達13.3％。四倍體蕙蘭在二倍體的適宜

3、增殖培養(yǎng)基上增殖，在MS+1.0 mg、LIBA的生根培養(yǎng)基上生根，增殖與生根情況良好，移栽成活率為60％。 對誘導(dǎo)獲得的四倍體蕙蘭新種質(zhì)與二倍體植株進行了外部形態(tài)和細胞學(xué)的比較觀察，結(jié)果表明：在同一生長階段和環(huán)境條件下，四倍體植株葉片形態(tài)充分體現(xiàn)了器官的巨大性。葉厚和葉寬分別是二倍體的185.7％和143.7％，而葉長和葉形指數(shù)均變小，分別為二倍體的83.5％和58.1％，方差分析差異達到極顯著水平；葉片顏色加深，葉脈明顯；植

4、株較二倍體粗壯，根系較二倍體的肥大。對獲得的四倍體與二倍體進行了氣孔特征的比較，結(jié)果表明：四倍體氣孔密度明顯下降，為二倍體的55.2％；四倍體保衛(wèi)細胞明顯增大，長度和寬度分別為二倍體的146.5％和140.5％：保衛(wèi)細胞內(nèi)葉綠體數(shù)目增多，約為二倍體數(shù)目的142.6％；氣孔增大，長度和寬度分別為二倍體的157.6％和128.4％，經(jīng)方差分析上述各項指標均達到了極顯著水平。因此，葉片厚度、葉片寬度、葉形指數(shù)、氣孔密度、保衛(wèi)細胞的大小和保衛(wèi)細