以12個(gè)柑橘四倍體為父本倍性雜交培育三倍體.pdf

1、選育品質(zhì)優(yōu)良的無(wú)核果實(shí)是柑橘育種者的主要目標(biāo)。因?yàn)闇p數(shù)分裂過(guò)程發(fā)生異常，三倍體柑橘無(wú)法形成正常類型配子而高度不育，是天然的無(wú)核類型。倍性雜交是獲得三倍體無(wú)核柑橘的重要途徑之一。本研究主要以性狀優(yōu)良但多籽的二倍體柑橘品種作母本，與雙二倍體或異源四倍體體細(xì)胞雜種作父本進(jìn)行倍性雜交，并結(jié)合胚挽救及流式細(xì)胞儀倍性鑒定，以期培育一批具有優(yōu)良性狀的柑橘三倍體有性后代，為選育無(wú)核柑橘新品種及其相關(guān)研究提供豐富的實(shí)驗(yàn)材料。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　

2、1.以單胚性二倍體品種作母本的2X×4X雜交組合創(chuàng)制柑橘三倍體。以沙田柚等6個(gè)單胚性二倍體為母本與5個(gè)異源四倍體和2個(gè)雙二倍體為父本進(jìn)行雜交，配置得到11個(gè)雜交授粉組合。從299個(gè)授粉果實(shí)中共剝?nèi)?526粒種子，經(jīng)胚挽救獲得362株再生植株，對(duì)全部再生植株倍性鑒定后得到285株三倍體和2株四倍體植株，三倍體發(fā)生率為78.73％，四倍體發(fā)生率為0.55％。目前，所有成活的三倍體和四倍體植株均已移栽至溫室，絕大部分植株已嫁接至田間。利用篩選

3、獲得的7對(duì)多態(tài)性SSR引物，對(duì)沙田柚×4X椪柑等2個(gè)組合的36個(gè)雜交后代植株進(jìn)行遺傳鑒定，結(jié)果表明16株二倍體植株為非雜種后代，20株三倍體植株為雙親的有性后代。
　　2.以多胚性二倍體作母本的2X×4X倍性雜交組合創(chuàng)制柑橘三倍體。以W.默科特橘橙等4個(gè)多胚性二倍體為母本，與9個(gè)四倍體父本材料進(jìn)行有性雜交，配置得到11個(gè)雜交授粉組合。對(duì)2015-2016年829個(gè)幼果的8181粒種子進(jìn)行離體培養(yǎng)后得到2697株再生植株。經(jīng)倍性鑒定

4、共得到185株多倍體，其中三倍體植株107株，占多倍體的57.84％;四倍體植株78株，占多倍體的42.16％，已經(jīng)成活的三倍體植株和四倍體植株均已移栽至溫室，部分生長(zhǎng)健壯的多倍體已嫁接至田間。2017年以W.默科特橘橙為母本的雜交組合，對(duì)223個(gè)幼果的2122粒種子進(jìn)行胚挽救，目前胚狀體仍在誘導(dǎo)生芽與生根階段，暫未獲得多倍體植株。在胚挽救的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，從植株下胚軸和幼嫩的胚狀體周圍長(zhǎng)出許多胚性愈傷組織，且父本材料不同，其愈傷組織的胚性

5、發(fā)生能力不同。將這些胚性愈傷組織在MT固體培養(yǎng)基多次繼代后發(fā)現(xiàn)其胚胎發(fā)生能力也逐漸減弱。經(jīng)倍性鑒定，12個(gè)不同株系的愈傷組織為二倍體，1個(gè)為二倍體和三倍體的混倍體，遺傳雜合性有待后續(xù)鑒定。目前這些胚性愈傷組織已被用作本課題組相關(guān)研究的實(shí)驗(yàn)材料。此外，利用篩選獲得的3對(duì)多態(tài)性SSR引物，對(duì)本地早橘×4X椪柑組合的雜交后代植株進(jìn)行遺傳鑒定，結(jié)果表明29株三倍體植株為雙親的有性后代，1株四倍體植株為母本珠心細(xì)胞加倍形成的雙二倍體。