小果型西瓜離體培養(yǎng)關(guān)鍵技術(shù)及四倍體誘導(dǎo)研究.pdf

1、西瓜味甜多汁,是祛暑降溫的上等果品,有“夏季水果之王”的美譽(yù),在國民經(jīng)濟(jì)中占有重要地位。西瓜的種植面積和產(chǎn)量在世界十大水果中僅次于葡萄、香蕉、柑橘和蘋果,居第五位。本試驗(yàn)以小果型西瓜優(yōu)良自交系(048、MH-39-1、032、028-5-5、047-1)為材料,首先對(duì)小果型西瓜再生體系進(jìn)行優(yōu)化,其次,利用誘變劑秋水仙素和新型誘變劑胺磺靈(Oryzalin)對(duì)子葉近胚軸端進(jìn)行離體誘變,研究基因型、誘變劑濃度、處理時(shí)間及處理方式對(duì)小果型西瓜

2、四倍體的誘變效果,并對(duì)再生植株進(jìn)行倍性鑒定、馴化移栽,獲得了較高的四倍體誘導(dǎo)率及優(yōu)良的四倍體小果型材料,為今后三倍體小果型西瓜的高效、快速育種提供了參考依據(jù)。研究結(jié)果如下:
　　 1、離體培養(yǎng)關(guān)鍵技術(shù)研究
　　 試驗(yàn)材料的無菌苗獲得以在28℃條件下,先暗培養(yǎng)3天,待胚根長(zhǎng)到0.5cm左右時(shí)轉(zhuǎn)到光下培養(yǎng)較為適宜;但基因型不同,其成熟種胚萌發(fā)率也不同,048基因型的種胚萌發(fā)率最高,為98.5％。不定芽誘導(dǎo)的外植體以3～5d苗

3、齡的子葉近胚軸端為宜,最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA2.0mg/L?；蛐蛯?duì)不定芽的誘導(dǎo)有一定影響,047-1基因型的不定芽誘導(dǎo)率最高,為92.5％。B(1/2MS+IBA0.3mg/L)、L(1/2MS,Fe3+不變+0.2IAAmg/L)是較理想的生根培養(yǎng)基,二者的生根率和根條數(shù)分別為79.3％,4.5條;80.0％,5.5條。
　　 2、秋水仙素誘導(dǎo)西瓜四倍體
　　 小果型西瓜基因型不同,秋水仙素濃度及處理時(shí)間不同,四

4、倍體誘導(dǎo)率差異較大。048、MH-39-1、028-5-5三個(gè)基因型均能誘導(dǎo)獲得四倍體,不同基因型所需秋水仙素的處理時(shí)間及濃度不同,其中048于400 mg/L秋水仙素處理36h,四倍體誘導(dǎo)率最高,達(dá)30.8％。
　　 3、Oiryzalin誘導(dǎo)西瓜四倍體
　　 基因型不同,濃度不同,處理時(shí)間不同,處理方式不同,四倍體誘導(dǎo)率有較大差異。采用液體培養(yǎng)誘導(dǎo)小果型西瓜四倍體的誘導(dǎo)率(14.96％)顯著高于固體培養(yǎng)(4.0％),

5、處理時(shí)間為4d較適宜。048、032、047-1三個(gè)基因型小果型西瓜材料的四倍體誘導(dǎo)率差異性不顯著,但是以032基因型采用Oryzalin50mg/L處理48h,四倍體誘導(dǎo)率最高,為33.3％。
　　 4、小果型西瓜四倍體鑒定
　　 試驗(yàn)采用形態(tài)學(xué)、葉綠體計(jì)數(shù)法和根尖染色體計(jì)數(shù)法進(jìn)行倍性鑒定方法比較,結(jié)果表明,葉綠體計(jì)數(shù)法與根尖染色體計(jì)數(shù)法的吻合率為90.8％,說明葉綠體計(jì)數(shù)法是可靠的,而且該方法操作較簡(jiǎn)單。