動(dòng)脈管壁“孫絡(luò)—微血管”滋生在動(dòng)脈粥樣硬化早期病變中的作用及通絡(luò)干預(yù)研究.pdf

1、目的:本研究以脈絡(luò)學(xué)說營(yíng)衛(wèi)“由絡(luò)以通、交會(huì)生化”理論為指導(dǎo)，通過單純高脂飲食建立兔動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)早期病變模型，通過動(dòng)態(tài)觀察其血脂變化、主動(dòng)脈缺氧狀況、管壁微血管密度、主動(dòng)脈內(nèi)皮依賴性舒張功能及主動(dòng)脈內(nèi)膜病理等變化過程，以及主動(dòng)脈組織中炎癥和氧化應(yīng)激相關(guān)因子的表達(dá)，探討管壁“孫絡(luò)-微血管”滋生在AS早期病變中的作用及相關(guān)機(jī)制;采用高脂飲食疊加頸動(dòng)脈包裹硅膠管，建立兔AS早期管壁“孫絡(luò)-微血管”滋生病變

2、動(dòng)物模型，通過觀察管壁微血管的空間密度，進(jìn)一步探討通心絡(luò)對(duì)管壁微血管滋生的干預(yù)效果和作用機(jī)制，為揭示脈絡(luò)學(xué)說營(yíng)衛(wèi)“由絡(luò)以通、交會(huì)生化”理論的科學(xué)內(nèi)涵提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:通過文獻(xiàn)檢索與資料整理，在深入挖掘中醫(yī)文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，圍繞營(yíng)衛(wèi)學(xué)說與血脈理論，以脈絡(luò)學(xué)說為指導(dǎo)，探討動(dòng)脈管壁微血管滋生在AS早期病變中的作用，以及營(yíng)衛(wèi)“由絡(luò)以通，交會(huì)生化”異常與AS早期管壁微血管病變的關(guān)系以及通絡(luò)藥物作用機(jī)制。
　　1、動(dòng)脈管壁“孫絡(luò)-微

3、血管”滋生在動(dòng)脈粥樣硬化早期病變中的作用
　　采用高脂飲食喂養(yǎng)新西蘭兔建立AS早期病變動(dòng)物模型，動(dòng)態(tài)觀察其主動(dòng)脈缺氧狀況、管壁微血管密度、主動(dòng)脈內(nèi)皮依賴性舒張功能及主動(dòng)脈內(nèi)膜的病理變化等。將110只普通級(jí)新西蘭兔隨機(jī)分為正常飲食組(50只)和高脂飲食組（60只）。正常飲食組給予普通飼料，高脂飲食組給予高脂飼料（配方:膽固醇1％，蛋黃粉7.5％，豬油5％，基礎(chǔ)飼料86.5％），每兔每日喂食100g,分2次喂飼,自由飲水，實(shí)驗(yàn)周期共6

4、周。兩組動(dòng)物分別于高脂喂食后3天、1周、2周、4周和6周末各隨機(jī)取2只動(dòng)物用于主動(dòng)脈整體油紅O染色，8～10只動(dòng)物用于其它指標(biāo)的檢查。處死前禁食12h，留取血液標(biāo)本和組織標(biāo)本，檢測(cè)血脂四項(xiàng)水平、血清內(nèi)皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)水平、MDA、SOD、T-AOC活性，采用離體血管環(huán)檢測(cè)腹主動(dòng)脈內(nèi)皮依賴性血管舒張功能;光鏡下觀察各組動(dòng)物腹主動(dòng)脈形態(tài)學(xué)變化;免疫組織化學(xué)染色方法檢測(cè)腹主動(dòng)脈組織中CD34抗體、HIF-1α抗體表達(dá);分

5、子生物學(xué)檢測(cè)主動(dòng)脈組織中HIF-1α、NF-κB、TNF-α、IL-6、Nrf2、γ-GCS及HO-1 mRNA和蛋白表達(dá)。
　　2、通心絡(luò)對(duì)管壁“孫絡(luò)-微血管”滋生、炎癥及氧化應(yīng)激水平的影響
　　采用高脂飲食配合頸動(dòng)脈包裹硅膠管的方法來建立新西蘭兔頸動(dòng)脈管壁微血管滋生病變模型，觀察通心絡(luò)對(duì)管壁微血管滋生的干預(yù)效果并探討其作用機(jī)制。手術(shù)方法:動(dòng)物稱重麻醉后仰臥位固定于術(shù)臺(tái)，分層切開皮膚并分離皮下筋膜及肌肉組織，用眼科鑷配合玻

6、璃分針小心剝開總動(dòng)脈鞘膜，分離出長(zhǎng)約3cm的頸總動(dòng)脈，把消毒后的硅膠管(長(zhǎng)28mm，內(nèi)徑1.7mm，外徑3.2mm)，縱向剖開后包裹于左側(cè)頸總動(dòng)脈，并在硅膠管縫隙處涂少量道康寧硅膠732，然后將頸動(dòng)脈放回原位，再予青霉素16萬單位局部注射預(yù)防感染。將290只普通級(jí)新西蘭兔隨機(jī)分為正常組、模型組、阿托伐他汀組和通心絡(luò)高、中、低劑量組，正常組40只，其余各組每組50只。正常組喂飼普通顆粒飼料，其余各組動(dòng)物均給予高脂飼料并配合左側(cè)頸動(dòng)脈硅膠管

7、包裹，各治療組在造模當(dāng)天同時(shí)給予藥物干預(yù)。給藥量為:阿托伐他汀2.5mg/kg，通心絡(luò)高劑量0.6g/kg、中劑量0.3g/kg，低劑量0.15g/kg。實(shí)驗(yàn)前用0.5％羧甲基纖維素鈉水溶液分別將藥物配制成混懸液，阿托伐他汀濃度為0.83mg/ml，通心絡(luò)高、中、低劑量濃度分別為0.2g/ml、0.1g/ml、0.05g/ml，灌胃體積均為3ml/kg，每日1次。所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均自由飲水，實(shí)驗(yàn)周期為6周。每組動(dòng)物分別于給藥后3天、1周、2

8、周、4周和6周末各隨機(jī)8～10只動(dòng)物進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)檢查。血脂四項(xiàng)、ET-1、NO水平、MDA、SOD、T-AOC活性檢測(cè);光鏡下觀察各組動(dòng)物左側(cè)頸動(dòng)脈形態(tài)學(xué)變化及管壁微血管內(nèi)皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu);Micro-CT和免疫組化檢測(cè)左側(cè)頸動(dòng)脈管壁微血管密度(MVD);彩色微球法檢測(cè)微血管內(nèi)血流量變化;RT-qPCR檢測(cè)NF-κB、TNF-α、IL-6、Nrf2及NQO1基因相對(duì)表達(dá)量;Western Blot檢測(cè)動(dòng)脈組織總NF-κB、核NF-κB、T

9、NF-α、IL-6、總Nrf2、核Nrf2及NQO1蛋白表達(dá)水平。
　　3、通心絡(luò)對(duì)管壁“孫絡(luò)-微血管”滋生DLL4/Notch信號(hào)通路的影響
　　造模方法及實(shí)驗(yàn)分組同第三部分。采用RT-qPCR檢測(cè)動(dòng)脈組織中VEGF-A、VEGF-R2、DLL4及Notch1 mRNA相對(duì)表達(dá)量;Western Blot檢測(cè)動(dòng)脈組織VEGF-A、VEGF-R2、DLL4及Notch1蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1、動(dòng)脈管壁“孫

10、絡(luò)-微血管”滋生在動(dòng)脈粥樣硬化早期病變中的作用
　　1.1各組動(dòng)物不同時(shí)間節(jié)點(diǎn)血脂水平變化
　　高脂飲食組血清TC、TG、HDL-C和LDL-C水平于高脂喂養(yǎng)2周到6周時(shí)依次明顯升高，而且均高于同期正常飲食組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或P＜0.01)
　　1.2腹主動(dòng)脈形態(tài)學(xué)變化（油紅O染色和HE染色）
　　主動(dòng)脈整體油紅O染色:正常飲食組主動(dòng)脈大體觀察呈乳白色，彈性較好，內(nèi)膜光滑平整，未見油紅著色。高脂

11、飲食喂養(yǎng)3天、1周、2周后，其主動(dòng)脈油紅O染色結(jié)果與正常飲食組比較未見明顯變化，而在高脂喂養(yǎng)4周、6周后，其主動(dòng)脈彈性稍差，內(nèi)膜可見少量斑片狀紅色區(qū)域，即脂質(zhì)條紋形成，多位于胸主動(dòng)脈下段、腹主動(dòng)脈及其有分支的地方。
　　光鏡觀察（HE染色）主動(dòng)脈內(nèi)中膜變化:正常組及高脂喂養(yǎng)3天、1周、2周時(shí)主動(dòng)脈內(nèi)膜內(nèi)皮細(xì)胞完整連續(xù)，胞核扁平，與內(nèi)彈力版貼合緊密，中膜平滑肌走行清晰;4周時(shí)動(dòng)脈內(nèi)膜處見少量泡沫狀巨噬細(xì)胞形成，中膜間隙增寬;6周時(shí)內(nèi)

12、膜明顯增厚，內(nèi)皮下可見大量泡沫細(xì)胞積聚，部分彈力纖維波紋斷裂或消失，中膜間隙增寬明顯。
　　光鏡觀察（HE染色）主動(dòng)脈外膜變化:正常組主動(dòng)脈、高脂喂養(yǎng)3天、1周時(shí)主動(dòng)脈外膜可見少量微血管;高脂喂養(yǎng)2周后外膜微血管數(shù)量開始增多。
　　1.3主動(dòng)脈管壁微血管密度和HIF-1α抗體表達(dá)（免疫組化）比較
　　高脂飲食組主動(dòng)脈管壁微血管密度（CD34抗體染色陽性）從高脂喂養(yǎng)2周至6周出現(xiàn)進(jìn)行性增加（P均＜0.05），且均高于同期

13、正常飲食組(P＜0.05或P＜0.01)。兩組動(dòng)物主動(dòng)脈HIF-1α抗體染色顯示自3天至4周均未出現(xiàn)明顯的陽性表達(dá)，唯6周時(shí)高脂飲食組主動(dòng)脈HIF-1α抗體染色稍有弱陽性表達(dá)。
　　1.4不同時(shí)間節(jié)點(diǎn)腹主動(dòng)脈內(nèi)皮依賴性血管舒張功能變化
　　從3天至6周，正常飲食組內(nèi)皮依賴性血管舒張功能在各時(shí)間節(jié)點(diǎn)均高于90％;高脂飲食組內(nèi)皮依賴性血管舒張功能于4周至6周時(shí)呈現(xiàn)出進(jìn)行性下降，分別為53.55％和49.95％，并且均低于同期正常

14、飲食組，差異有顯著性（P均＜0.01）。
　　1.5內(nèi)皮依賴性血管舒張功能與管壁微血管密度相關(guān)性分析
　　以模型組管壁微血管密度為自變量，內(nèi)皮依賴性血管舒張功能為因變量對(duì)二者進(jìn)行Spearman相關(guān)性分析，結(jié)果顯示相關(guān)系數(shù)為r=-0.824，P＜0.01，二者呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系，提示動(dòng)脈舒張功能在一定范圍內(nèi)隨著管壁微血管密度的增加而降低。
　　1.6血清ET-1、NO、SOD、MDA及T-AOC水平變化
　　與正常

15、飲食組比較，高脂飲食組血清ET-1和MDA水平進(jìn)行性升高，組間差異在4周和6周時(shí)均出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.01）;血清NO、SOD及T-AOC水平則表現(xiàn)為進(jìn)行性下降，均低于同期正常飲食組，亦在4周和6周時(shí)出現(xiàn)顯著性差異（P均＜0.01）。
　　1.7主動(dòng)脈HIF-1α、NF-κB、TNF-α、IL-6、Nrf2、γ-GCS及HO-1 mRNA表達(dá)比較（4周）
　　與正常飲食組比較，高脂飲食組主動(dòng)脈組織中HIF-1α、NF-

16、κB及Nrf2的mRNA表達(dá)均未出現(xiàn)顯著性差異(P＞0.05); TNF-α和IL-6的mRNA表達(dá)顯著升高（P均＜0.01），γ-GCS和HO-1的mRNA表達(dá)則顯著降低(P均＜0.01)。
　　1.8主動(dòng)脈HIF-1α、NF-κB、TNF-α、IL-6、Nrf2、γ-GCS及HO-1蛋白水平比較（4周）
　　與正常飲食組比較，高脂飲食組主動(dòng)脈組織中HIF-1α的蛋白水平未見顯著性差異(P＞0.05); NF-κB、TNF

17、-α和IL-6的蛋白水平顯著升高(P均＜0.05或P＜0.01);Nrf2、γ-GCS及HO-1蛋白水平則顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。
　　2、通心絡(luò)對(duì)管壁“孫絡(luò)-微血管”滋生、炎癥及氧化應(yīng)激水平的影響
　　2.1各組動(dòng)物血脂水平變化
　　模型組血清TC、TG、HDL-C和LDL-C水平于高脂喂養(yǎng)2周到6周依次明顯升高，且均高于同期正常飲食組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或P＜0.01)。與模型組

18、比較，阿托伐他汀組和通心絡(luò)高、中劑量組給藥后2周TC和LDL-C水平開始出現(xiàn)顯著下降(P＜0.05或P＜0.01)，阿托伐他汀組的下降幅度大于通心絡(luò)高、中劑量組，但未出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，此三組之間TC水平在給藥4周和6周時(shí)無明顯差異(P＞0.05);三組TG水平從4周開始明顯下降(P＜0.05或P＜0.01);三組HDL-C水平4周到6周雖高于模型組，但未出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）;通心絡(luò)低劑量組在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)與模型組相比

19、均無顯著性差異(P＞0.05)。
　　2.2各組動(dòng)物血清ET-1、NO、MDA、SOD及T-AOC水平比較
　　與正常組比較，模型組血清ET-1水平、MDA含量進(jìn)行性升高，均在4周和6周時(shí)差異出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.01）;血清NO、SOD及T-AOC水平表現(xiàn)為進(jìn)行性下降，且均低于同期正常組，也均在4周和6周時(shí)出現(xiàn)顯著性差異（P均＜0.01）。與模型組比較，阿托伐他汀組和通心絡(luò)高劑量組在給藥后4周時(shí)，通心絡(luò)中劑量組在給藥6

20、周時(shí)，血清ET-1和MDA水平開始顯著下降(P＜0.05或P＜0.01)，血清NO、SOD及T-AOC水平開始明顯上升(P＜0.05或P＜0.01)，且三組之間無顯著性差異（P＞0.05）;通心絡(luò)低劑量組各項(xiàng)指標(biāo)在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)與模型組比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＞0.05)。
　　2.3各組動(dòng)物頸動(dòng)脈組織形態(tài)學(xué)變化
　　2.3.1光鏡下觀察(HE染色)
　　正常組及未包管側(cè)頸動(dòng)脈內(nèi)膜光滑，內(nèi)皮細(xì)胞完整連續(xù)，胞核扁平，與內(nèi)彈力

21、版貼合緊密，中膜平滑肌走行清晰，外膜可見少量微血管。
　　模型組術(shù)側(cè)（左側(cè)）頸動(dòng)脈形態(tài)學(xué)變化明顯:(1)血管內(nèi)膜:包管3天時(shí)內(nèi)膜完整無增生;1周時(shí)內(nèi)膜輕度增生;2周到6周時(shí)內(nèi)膜出現(xiàn)彌漫性增生，并進(jìn)行性加重，新生內(nèi)膜中以單核細(xì)胞為主。(2)血管中膜:包管3天到1周時(shí)，內(nèi)彈力板彎曲，中膜輕度增厚;2周時(shí)內(nèi)彈力板彎曲加重;4周到6周時(shí)中膜間隙增寬，平滑肌細(xì)胞和彈力纖維排列紊亂。(3)血管外膜:包管3天時(shí)外膜微血管數(shù)量增多，1周時(shí)炎癥細(xì)胞

22、浸潤(rùn)明顯，2周到
　　6周時(shí)外膜微血管密度進(jìn)一步增加。
　　與同期模型組比較，阿托伐他汀組、通心絡(luò)高、中劑量組術(shù)側(cè)頸動(dòng)脈病理損傷均有不同程度減輕:內(nèi)膜增生減輕，內(nèi)皮下泡沫細(xì)胞數(shù)量減少，內(nèi)彈力板彎曲，部分彈力纖維排列紊亂，中膜平滑肌走行清晰，增生不明顯，外膜微血管數(shù)量不同程度減少，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)減輕。
　　2.3.2透射電鏡觀察管壁微血管內(nèi)皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)
　　正常組:內(nèi)皮細(xì)胞完整，形態(tài)正常，結(jié)構(gòu)清晰，胞漿內(nèi)線粒體形態(tài)

23、正常，并可見吞飲小泡，細(xì)胞間連接緊密，細(xì)胞外基質(zhì)膜連續(xù)完好。
　　模型組:內(nèi)皮細(xì)胞萎縮、破損，細(xì)胞內(nèi)線粒體部分嵴和膜融合甚至消失，并可見空泡樣變，細(xì)胞間隙擴(kuò)張，細(xì)胞間連接斷裂、部分脫落，細(xì)胞外基質(zhì)松散、不連續(xù)，部分區(qū)域溶解。
　　各治療組:均可不同程度減輕上述超微結(jié)構(gòu)的改變，整個(gè)細(xì)胞結(jié)構(gòu)基本正常，部分細(xì)胞內(nèi)偶見空泡樣變，以通心絡(luò)高劑量組內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)與結(jié)構(gòu)病變最為輕微。
　　2.4各組動(dòng)物頸動(dòng)脈管壁微血管密度比較

24、　　模型組頸動(dòng)脈管壁微血管密度于實(shí)驗(yàn)后第3天開始持續(xù)升高，與同期正常組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或P＜0.01);與模型組比較，阿托伐他汀組和通心絡(luò)高劑量組在給藥后4周和6周時(shí)，頸動(dòng)脈管壁微血管密度均明顯減少（P均＜0.05），且兩者之間無顯著性差異（P＞0.05），通心絡(luò)中、低劑量組在各時(shí)間點(diǎn)與之相比均未出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　2.5各組動(dòng)物頸動(dòng)脈管壁微血管血流量比較
　　模型組頸動(dòng)脈管壁微血管血

25、流量于1周開始持續(xù)升高，與同期正常組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或P＜0.01);與模型組比較，通心絡(luò)高劑量組在給藥后4周到6周，通心絡(luò)中劑量在給藥后6周，頸動(dòng)脈管壁微血管血流量均明顯下降（P均＜0.05），阿托伐他汀組、通心絡(luò)低劑量組在各時(shí)間點(diǎn)與之相比均未出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　2.6各組動(dòng)物術(shù)側(cè)頸動(dòng)脈4周時(shí)NF-κB、TNF-α、IL-6、Nrf2及NQO1mRNA表達(dá)比較
　　與正常組比較，模型

26、組TNF-α、IL-6 mRNA表達(dá)顯著上升高，NQO1mRNA表達(dá)明顯降低（P均＜0.01），NF-κB、Nrf2 mRNA表達(dá)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);與模型組比較，阿托伐他汀組、通心絡(luò)高、低劑量組TNF-α mRNA表達(dá)均明顯下降(P＜0.01)，同時(shí)，各用藥組IL-6 mRNA表達(dá)亦明顯下降，且NQO1 mRNA表達(dá)上升(P＜0.05或P＜0.01)。
　　2.7各組動(dòng)物4周時(shí)總NF-κB、核NF-κB、TNF-α、

27、IL-6、總Nrf2、核Nrf2、及NQO1蛋白表達(dá)變化
　　正常組、模型組、及各用藥組總NF-κB、總Nrf2蛋白表達(dá)未見明顯差異(P＞0.05)。
　　與正常組比較，模型組核NF-κB、TNF-α、IL-6蛋白表達(dá)量顯著升高(P＜0.01);與模型組比較，阿托伐他汀組、通心絡(luò)大劑量組的核NF-κB蛋白表達(dá)明顯下降(P＜0.01)，通心絡(luò)大劑量組TNF-α蛋白表達(dá)和各用藥組IL-6蛋白表達(dá)亦明顯下降(P＜0.05)。

28、>　　與正常組比較，模型組核Nrf2、NQO1蛋白表達(dá)顯著下降(P＜0.05);與模型組比較，阿托伐他汀組、通心絡(luò)大、中劑量組核Nrf2蛋白表達(dá)明顯上升(P＜0.05或P＜0.01)，各用藥組NQO1蛋白表達(dá)亦不同程度增加(P＜0.05或P＜0.01)。
　　3、通心絡(luò)對(duì)管壁“孫絡(luò)-微血管”滋生DLL4/Notch信號(hào)途徑的影響
　　各組動(dòng)物VEGF-A、VEGF-R2、DLL4及Notch1 mRNA表達(dá)比較:與正常組比較

29、，模型組頸動(dòng)脈組織中VEGF-A和VEGF-R2的mRNA表達(dá)均顯著上升，DLL4和Notch1的mRNA表達(dá)均明顯下降（P均＜0.01）;與模型組比較，阿托伐他汀組及通心絡(luò)各劑量組VEGF-A和VEGF-R2的mRNA表達(dá)均明顯下降(P＜0.05或P＜0.01)，同時(shí)，阿托伐他汀組和通心絡(luò)高、中劑量組中DLL4和Notch1的mRNA表達(dá)均明顯上升(P＜0.01);與阿托伐他汀組比較，通心絡(luò)高、中劑量組VEGF-A、VEGF-R2的m

30、RNA表達(dá)和DLL4、Notch1的mRNA表達(dá)均未出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P均＞0.05）。
　　各組動(dòng)物VEGF-A、VEGF-R2、DLL4及Notch1蛋白表達(dá)比較:與正常組比較，模型組頸動(dòng)脈組織中VEGF-A和VEGF-R2的蛋白表達(dá)均顯著上升，而DLL4和Notch1的蛋白表達(dá)均明顯下降（P均＜0.01）;與模型組比較，阿托伐他汀組及通心絡(luò)高、中劑量組VEGF-A和VEGF-R2的蛋白表達(dá)均明顯下降(P＜0.05或P＜0.01

31、)，同時(shí)，阿托伐他汀組和通心絡(luò)各劑量組DLL4和Notch1的蛋白表達(dá)明顯上升(P＜0.01);與阿托伐他汀組比較，通心絡(luò)高、中劑量組VEGF-A、VEGF-R2的蛋白表達(dá)和DLL4、Notch1的蛋白表達(dá)均未出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P均＞0.05）。
　　結(jié)論:
　　1.本研究通過高脂飲食建立兔AS早期病變模型，外膜管壁微血管滋生早于大血管結(jié)構(gòu)與功能損傷和內(nèi)膜脂質(zhì)條紋形成而發(fā)生，即微血管病變?cè)缬诖笱懿∽儯掖笱軆?nèi)皮依賴性舒張功

32、能隨著血管外膜管壁微血管密度的增加而降低，提示管壁微血管滋生促進(jìn)了AS早期病變的發(fā)生發(fā)展。在管壁微血管滋生過程中，炎癥水平上升和抗氧化應(yīng)激能力下降發(fā)揮著重要作用。
　　2.通過頸動(dòng)脈包裹硅膠管配合高脂飲食建立兔AS早期管壁微血管滋生病變模型。通心絡(luò)通過抑制NF-κB核轉(zhuǎn)位和促進(jìn)Nrf2核轉(zhuǎn)位，降低頸動(dòng)脈組織的炎癥水平，提高其抗氧化能力，保護(hù)管壁微血管結(jié)構(gòu)的完整性，從而抑制了管壁“孫絡(luò)-微血管”滋生，最終減輕了AS早期病變。

33、　　3.AS早期管壁微血管滋生與DLL4/Notch信號(hào)通路受到抑制有關(guān)，通心絡(luò)通過活化該信號(hào)通路，同時(shí)抑制VEGF-A、VEGF-R2的基因和蛋白表達(dá)，從正反兩方面調(diào)節(jié)了血管生成，減輕了AS早期病理改變。
　　4.本研究以脈絡(luò)學(xué)說為指導(dǎo)，基于孫絡(luò)與微血管解剖形態(tài)學(xué)上的同一性，指出了動(dòng)脈管壁“孫絡(luò)-微血管”是營(yíng)氣與衛(wèi)氣“由絡(luò)以通，交會(huì)生化”，維持動(dòng)脈營(yíng)養(yǎng)代謝的重要途徑和處所，“孫絡(luò)-微血管”營(yíng)衛(wèi)“由絡(luò)以通，交會(huì)生化”異常所致的動(dòng)脈