瑪咖酰胺的提取分離及其緩解體力疲勞活性的研究.pdf

1、瑪咖酰胺是瑪咖中特有的活性成分，具有緩解體力疲勞的功效。由于瑪咖酰胺含量較少，且缺乏系統(tǒng)的提取分離工藝，目前關(guān)于瑪咖酰胺緩解體力疲勞的研究主要集中在活性驗證層面上。因此，本研究以瑪咖塊根為原料，通過酶輔助提取制備瑪咖酰胺粗提物，再通過大孔樹脂進行分離，最后研究獲得的兩種瑪咖酰胺提取物緩解體力疲勞的活性并對其機理進行簡單解析，為后續(xù)深入研究瑪咖的抗疲勞機制提供科學(xué)依據(jù)。本論文的主要研究結(jié)果匯總?cè)缦?
　　(1)以總瑪咖酰胺含量為指標(biāo)

2、，用響應(yīng)面法優(yōu)化酶輔助回流提取總瑪咖酰胺的工藝。最佳工藝參數(shù)為:瑪咖粉在纖維素酶添加量為1.5％，溫度50℃，pH=4.5檸檬酸溶液中（瑪咖粉與檸檬酸溶液料液比為1∶4，w/v）預(yù)處理2h后，按1∶16料液比加入95％乙醇，在70℃條件下回流提取2次，每次2.8h。按此工藝條件提取的總瑪咖酰胺含量為2.12mg/g。
　　(2)通過比較四種大孔樹脂對瑪咖酰胺吸附和解吸能力，得X-5大孔樹脂最適合用于瑪咖酰胺粗提物的分離。瑪咖酰胺粗

3、提取物經(jīng)X-5樹脂分離的最佳工藝為:100mL質(zhì)量濃度為0.212mg/mL的粗提物，以2mL/min上樣流速，上樣至柱體積為50mL的大孔樹脂柱（約20g樹脂，即1g樹脂能吸附5mL質(zhì)量濃度為0.212mg/mL的樣液），靜置吸附3.5h。先用水洗至洗脫液無色后，再用140mL90％乙醇（1g樹脂需要7mL洗脫液），以2mL/min的洗脫流速進行洗脫。收集洗脫液，經(jīng)濃縮回收溶劑，冷凍干燥，得浸膏中總酰胺含量為17.09mg/g。

4、>　　(3)瑪咖酰胺粗提取物(CME)和經(jīng)分離后的瑪咖酰胺提取物(PME)均具有顯著的緩解體力疲勞效果，且PME的效果比CME的好。表現(xiàn)為:CME各劑量組比正常組游泳時間延長49.5-77.6％，而PME組則延長95.6-137.5％;PME各組游泳時間比陽性對照組顯著延長44.8-75.9％，CME低劑量組與陽性對照組無統(tǒng)計學(xué)意義。且PME高劑量組游泳時間比CME低劑量組顯著延長了58.8％。與陽性對照比，只有高劑量PME組肝糖原和肌

5、糖原分別顯著提高18.8％和25.2％;BLA顯著降低7.26％;兩種化合物對BUN效果均不好。CME和PME各劑量組，均比正常組顯著降低運動后小鼠血清中LDH(8.10-20.04％)，CK(15.29-42.68％)、和NEFA(12.95-23.2％)的水平，且骨骼肌和心肌損傷程度均比正常組和陽性對照組表現(xiàn)輕微。這兩種瑪咖酰胺提取物緩解體力疲勞的機制可能在于調(diào)節(jié)運動中能量代謝過程，加速脂肪酸的氧化供能，減輕運動中對骨骼肌和心肌細胞