洋金花中東莨菪堿的提取分離及其旋光穩(wěn)定性的研究.pdf

1、東莨菪堿是一種托品烷類生物堿，其具有散瞳、解痙、抗膽堿、麻醉、鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜等作用，國內外對其純品需求量非常的大。天然手性東莨菪堿的制備主要以洋金花為原料，其種植環(huán)境較為廣泛，但原料中生物堿的含量及相對比例差異非常大，若將目前的提取純化方法應用于一些低含量的原料，則存在提取率低、回收率低、富集性差等不足，從而影響后續(xù)分離純化，為此，開發(fā)一種提取率高、富集性好、回收率高的新工藝，以獲得高純東莨菪堿（純度＞99％），對洋金花的深度開發(fā)具有重要意

2、義。
　　本研究以安徽皖北地區(qū)種植的道地洋金花為原料，進行洋金花中東莨菪堿的提取及分離純化的工藝參數(shù)優(yōu)化，首先進行東莨菪堿純品的穩(wěn)定性研究，再進行提取工藝、分離工藝等參數(shù)的優(yōu)選，并將提高東莨菪堿旋光穩(wěn)定性的影響因子與提取、分離過程相結合，實現(xiàn)從源頭上開始控制目標物質的穩(wěn)定性。
　　本論文通過系統(tǒng)研究，主要結果如下:
　　(1)在穩(wěn)定性考察方面:通過對東莨菪堿在不同pH值酸堿溶液，不同溫度，不同光照強度下比旋光度的變化情

3、況，發(fā)現(xiàn)東莨菪堿在中性偏酸性條件下相對更加穩(wěn)定，在強酸中也會產生少量變旋和降解，而在堿性條件下會快速發(fā)生變旋和降解，且堿性越強，越容易降解;東莨菪堿在低溫環(huán)境下較為穩(wěn)定，當溫度超過80℃后，會產生快速的變旋和降解反應;東莨菪堿在避光條件下較為穩(wěn)定，當照度增加時，隨著儲存時間的延長，東莨菪堿會逐漸變旋和降解;相同條件下，東莨菪堿在高濃度時比低濃度時更容易發(fā)生變旋反應。因此，在制備過程中，應根據(jù)情況選擇對東莨菪堿旋光活性影響小的條件進行，在

4、儲存過程中，可采取用棕色瓶避光低溫保存、轉化為東莨菪堿鹽的形式進行儲存等方式提高東莨菪堿的旋光穩(wěn)定性。
　　(2)在提取工藝研究方面:通過對常規(guī)酸水提取法、常規(guī)乙醇提取法和超聲波輔助二氯甲烷提取法三種提取方法的對比，發(fā)現(xiàn)超聲波輔助二氯甲烷提取法具有更好的提取效果，不僅提取率高，而且工藝簡單，便于工業(yè)化生產。接著采用正交法對超聲波輔助二氯甲烷提取法進行工藝優(yōu)化，得到東莨菪堿最佳提取工藝條件為:原料與氨水質量體積比1∶2、超聲波功率1

5、80W、料液比1∶10、提取溫度25℃、提取時間30min、提取次數(shù)2次。在此最佳條件下，東莨菪堿的得率為0.091％，回收溶劑后浸膏中東莨菪堿含量為3.02％。此步驟雖然使用了大量的氨水，但是經(jīng)驗證，其對最終產物的旋光性并無顯著的影響。
　　(3)在分離純化研究方面:建立了一種結合液液萃取、大孔樹脂純化及結晶技術的從洋金花粗提物中分離純化東莨菪堿的方法，其具有高毒性有機溶劑用量小、獲得產品純度及回收率高、富集及純化效果強、樣品處

6、理量大、工藝簡單可行、可適用于低含量原料等諸多優(yōu)點。具體過程為:首先進行兩步液液萃取，第一步用氫溴酸水溶液(pH=6)萃取兩次洋金花粗提物的氯仿溶液，合并水相，第二步在弱堿環(huán)境下(pH=7.5)用四氯化碳萃取兩次第一步得到的水溶液，合并四氯化碳相，旋干，樣品中東莨菪堿的含量由粗提物中的3.02％升至28.9％;然后進行大孔樹脂純化，采用D151大孔樹脂在上樣體積10BV，上樣濃度0.191mg/mL，上樣液pH為8，上樣流速為2BV/h

7、，溫度為25℃，洗脫液酸水的pH為1，洗脫液用量為16BV，洗脫流速為2BV/h的條件下進行東莨菪堿純化，純化后樣品中的東莨菪堿含量為83.1％;最后在-20℃下進行低溫結晶，得到的氫溴酸東莨菪堿的純度為99.12％，回收率為77.45％。此步驟通過控制制備過程中的pH和照度保持在對東莨菪堿旋光性影響較小的范圍內并將最終產物成鹽進行其旋光穩(wěn)定性的提高，使用前可通過堿處理將氫溴酸東莨菪堿還原為東莨菪堿游離態(tài)。對制得的氫溴酸東莨菪堿晶體進行