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文檔簡介
1、目的:本文針對抗菌肽不宜在原核系統(tǒng)中直接表達(dá)、而在融合表達(dá)中產(chǎn)率低的問題,研究抗菌肽在真核表達(dá)所必需的環(huán)節(jié)-構(gòu)建抗菌肽CM4真核表達(dá)載體,為其在畢赤酵母菌中分泌表達(dá)奠定基礎(chǔ)。 方法:首先采用重疊區(qū)擴(kuò)增基因拼接法(SOE)合成CM4目的基因,并在此目的基因上加酶切位點(diǎn),然后構(gòu)建PMD19-T-CM4克隆載體。用EcoRI和NotI雙酶切抗菌肽CM4基因的PCR產(chǎn)物及pPICZαA空載體,之后用連接酶連接得到真核表達(dá)載體pPICZ
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