愛羅咳喘寧對COPD肺氣虛大鼠IL-8、TNF-α和MIP-2水平及MUC5AC、AQP5基因表達的影響.pdf

1、目的:
　　觀察愛羅咳喘寧方對慢性阻塞性肺疾病(Chronic Obstructive Pulmonary Disease,COPD)肺氣虛證大鼠模型肺功能，血漿、肺組織勻漿和支氣管肺泡灌洗液(Bronchial alveolar lavage fluid,BALF)中白細胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)、腫瘤壞死因子-α(Tumor neerosis faetor-alpha,TNF-α)、巨噬細胞炎癥蛋白-2

2、(Macrophage inflammatory protein-2,MIP-2)含量，肺組織病理，黏蛋白5AC(Mucin5AC,MUC5AC)及水通道蛋白5(Aquaporin5,AQP5)基因表達的影響，探究愛羅咳喘寧對 COPD肺氣虛證治療的作用及其機制，給愛羅咳喘寧方的臨床應用提供實驗依據(jù)，為開發(fā)治療COPD的中藥提供新思路。
　　方法：
　　將60只Wistar大鼠隨機分成6組，分別為正常對照組，模型組，愛羅咳喘

3、寧低劑量（7.76 g·kg-1·d-1）組、中劑量（15.52 g·kg-1·d-1）組、高劑量（31.04 g·kg-1·d-1）組和急支糖漿（3 ml·d-1）組，每組10只。以煙熏加氣管內(nèi)滴注脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)制備COPD穩(wěn)定期肺氣虛證大鼠模型，分別給予相應藥物干預；觀察并記錄大鼠一般狀況，檢測肺功能并取材。酶聯(lián)免疫吸附法檢測大鼠血漿、肺組織勻漿和支氣管肺泡灌洗液中IL-8、TNF-α、MIP

4、-2的含量，光鏡下觀察大鼠肺組織結構，原位雜交和免疫組化檢測肺組織中MUC5AC、AQP5基因mRNA和蛋白表達。有關實驗數(shù)據(jù)使用
　　SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行處理。
　　結果:
　　本研究制備COPD穩(wěn)定期肺氣虛證大鼠模型，以肺功能和病理學改變作為判定模型大鼠復制成功的依據(jù)。與正常組比較，模型組大鼠潮氣量(TV)、呼氣峰流速(PEF)、50％潮氣量呼氣流量(EF50)較正常組均明顯降低（P＜0.01或 P＜0.0

5、5）；血漿 IL-8、TNF-ɑ和MIP-2因子含量均顯著高于正常組（P＜0.01或P＜0.05），肺組織勻漿IL-8、TNF-ɑ和MIP-2因子含量均顯著高于正常組（P＜0.01或P＜0.05），支氣管肺泡灌洗液IL-8、TNF-ɑ和MIP-2因子含量均顯著高于正常組（P＜0.01或P＜0.05）；模型組氣管和肺組織中MUC5AC mRNA和蛋白表達均顯著增強，AQP5 mRNA和蛋白表達均顯著減弱，模型組MUC5AC蛋白和AQP5蛋

6、白表達呈負相關(氣管r=-0.528，P＜0.01；
　　肺組織r=-0.532，P＜0.01)。與模型組比較，愛羅咳喘寧低、中、高劑量組及急支糖漿組大鼠TV、PEF和EF50均顯著升高（P＜0.01或P＜0.05）；血漿中IL-8、TNF-ɑ和MIP-2因子含量均顯著低于模型組（均P＜0.01），肺組織勻漿IL-8、TNF-ɑ和MIP-2因子含量均顯著低于模型組（P＜0.01或P＜0.05），BALF中IL-8、TNF-ɑ和MI

7、P-2因子含量均顯著低于模型組（均 P＜0.01）；愛羅咳喘寧中劑量組氣管和肺組織中MUC5AC mRNA和蛋白表達均顯著減弱，AQP5 mRNA和蛋白表達均顯著增強，中劑量組 MUC5AC蛋白和AQP5蛋白表達呈負相關(氣管 r=-0.485，P＜0.05；肺組織r=-0.491，P＜0.01)。模型組支氣管管腔內(nèi)出現(xiàn)滲出物，細支氣管上皮有多處變性、壞死，管壁各層炎細胞浸潤顯著；黏膜下層黏液腺有增生、擴張；細支氣管及其周圍肺泡中出現(xiàn)較

8、大面積炎性細胞浸潤，可見局限性肺不張，病灶周圍出現(xiàn)肺大泡。與模型組比較，愛羅咳喘寧低、中、高劑量組及急支糖漿組的病理學改變相對較輕，中劑量組修復最為明顯。
　　結論：
　　1、愛羅咳喘寧能增強COPD肺氣虛大鼠肺通氣和換氣功能，改善COPD穩(wěn)定期大鼠肺氣虛癥狀。
　　2、愛羅咳喘寧可顯著減輕COPD肺氣虛大鼠炎癥反應，修復肺組織損傷，改善肺氣虛癥狀。其機制可能通過抑制細胞因子IL-8、TNF-ɑ和MIP-2的分泌，阻止