杜氏鹽藻基因組文庫(kù)的構(gòu)建.pdf

1、杜氏鹽藻屬綠藻門(mén)綠藻綱團(tuán)藻目，是一種生長(zhǎng)在海水或鹽湖的嗜鹽性浮游單細(xì)胞真核綠藻，不具細(xì)胞壁，細(xì)胞呈梨形或橢圓形，胞內(nèi)有一個(gè)大的杯狀葉綠體，有雙鞭毛，可以在水中游動(dòng)。該藻突出優(yōu)點(diǎn)在于耐鹽能力強(qiáng)，抗逆性極佳，可在0.05-5M的鹽水中生長(zhǎng)，是迄今所發(fā)現(xiàn)的最耐鹽的生物之一。杜氏鹽藻由于其極其耐鹽的能力，簡(jiǎn)單的細(xì)胞結(jié)構(gòu)以及便利的培養(yǎng)條件而成為研究鹽適應(yīng)性分子機(jī)制的重要模式生物和遺傳學(xué)研究的良好材料。杜氏鹽藻作為宿主表達(dá)外源基因，生產(chǎn)有用的外源蛋

2、白，具有繁殖速度快、培養(yǎng)簡(jiǎn)單、表達(dá)產(chǎn)物下游純化過(guò)程簡(jiǎn)單等優(yōu)越性。 基因組文庫(kù)是進(jìn)行基因組研究的基礎(chǔ)工作之一，其主要應(yīng)用于重要基因的克隆，基因的轉(zhuǎn)錄和調(diào)控的研究，探索基因的結(jié)構(gòu)和組成，基因組物理圖譜的構(gòu)建及基因組的測(cè)序。 隨著基因工程技術(shù)的迅速發(fā)展，人們對(duì)生物體基因的結(jié)構(gòu)、功能、表達(dá)及其調(diào)控機(jī)理的研究深入到分子水平，從而使得特定基因片段的分離和獲得成為可能?；蚪M文庫(kù)是含有某種生物體全部基因的隨機(jī)片段的重組DNA克隆群體。

3、 通過(guò)克隆基因組DNA片段可構(gòu)建基因組文庫(kù)，這些DNA片段是由限制性內(nèi)切酶對(duì)高分子質(zhì)量基因組DNA部分酶切而獲得，理論上講目的基因組中的每一個(gè)DNA序列都應(yīng)在重組克隆文庫(kù)中按比例呈現(xiàn)，但事實(shí)并非如此，相反在基因組文庫(kù)中，一些DNA序列完全丟失，而另一些序列卻被過(guò)度呈現(xiàn)。 基因組文庫(kù)的類型是由其選用的載體所決定的，而在基因組文庫(kù)構(gòu)建中影響載體選擇的主要因素是目標(biāo)區(qū)域的大小與載體的容量、文庫(kù)篩選的難易程度、載體的設(shè)計(jì)是否適合