葛根總異黃酮和黃連總生物堿組分配伍及其制劑初步研究.pdf

1、本試驗(yàn)主要對(duì)葛根總異黃酮和黃連總生物堿有效部位的制備工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、配伍比例及其組分配伍制劑的成型工藝進(jìn)行了系統(tǒng)研究，主要為了后期葛根總異黃酮和黃連總生物堿組分配伍制劑的進(jìn)一步研發(fā)打下基礎(chǔ)。主要內(nèi)容包括:
　　1、有效部位的有效成分
　　本課題前期試驗(yàn)研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，葛根素、3'-甲氧基葛根素、3'-羥基葛根素、大豆苷和大豆苷元這5種異黃酮成分是葛根總異黃酮有效部位治療2型糖尿病的主要有效成分;而非洲防己堿、表小檗堿、黃連堿、

2、巴馬汀、小檗堿這5種生物堿成分也是黃連總生物堿有效部位發(fā)揮其治療2型糖尿病功效的主要有效成分。
　　2、黃連、葛根飲片中有效部位HPLC含量測(cè)定研究
　　(1)建立了黃連飲片的總生物堿有效部位HPLC含量測(cè)定方法，同時(shí)測(cè)定了5個(gè)有效成分的含量，暫定黃連飲片中非洲防己堿的含量為0.40％～0.87％、小檗堿的含量為5.0％～10.24％、黃連堿的含量為1.66％～2.85％、表小檗堿的含量為0.75％～2.09％、巴馬汀的含量

3、為1.24％～2.78％。
　　(2)建立了葛根飲片的總異黃酮有效部位HPLC含量測(cè)定方法，同時(shí)測(cè)定了5個(gè)有效成分含量，暫定葛根飲片中3'-羥基葛根素的含量為0.56％～1.58％、大豆苷的含量為0.37％～1.30％、葛根素的含量為2.40％～9.27％、3'-甲氧基葛根素含量為0.72％～1.85％、大豆苷元的含量范圍為0.10％～0.43％。
　　3、有效部位制備工藝研究
　　(1)黃連總生物堿制備工藝:黃連飲片

4、70％乙醇回流提取，料液比為1∶15，煎煮3次，每次時(shí)間為90min，提取液回收乙醇，加入適量蒸餾水稀釋成濃度為37.5 mg·mL-1（生藥量計(jì)）的上柱液，以1BV·h-1吸附上AB-8樹脂柱（徑高比1∶10），用水以1 BV·h-1流速除雜5個(gè)柱體積，再用50％乙醇溶液以1 BV·h-1洗脫6個(gè)柱體積。合并洗脫液，回收乙醇，加熱濃縮成相對(duì)密度為1.06-1.10（60℃測(cè)）的流浸膏，65～75℃真空干燥，粉碎，即得黃連總生物堿有效部

5、位浸膏粉。
　　(2)葛根總異黃酮制備工藝:葛根飲片60％乙醇回流提取，料液比為1∶15，煎煮3次，每次60min，合并提取液，回收乙醇，加入適量蒸餾水稀釋至75mg·mL-1（生藥量計(jì)）的上柱液，以1BV·h-1吸附上AB-8樹脂柱（徑高比1∶10），用水以1 BV·h-1流速除雜5個(gè)柱體積，再用40％乙醇2 BV·h-1洗脫6個(gè)柱體積。合并洗脫液，回收乙醇，加熱濃縮成相對(duì)密度1.06-1.10（60℃測(cè)）的流浸膏，65～75℃

6、真空干燥，粉碎，即得葛根總異黃酮有效部位浸膏粉。
　　4、有效部位的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究
　　分別建立了葛根總異黃酮和黃連總生物堿有效部位的薄層色譜(TLC)鑒定方法、HPLC含量測(cè)定方法，并制定了有效部位中水分、重金屬、熾灼殘?jiān)鹊南薅?。暫定葛根總異黃酮有效部位含總異黃酮不得低于50％、黃連總生物堿有效部位含總生物堿不得低于70％。
　　5、組分配伍處方篩選
　　研究了6個(gè)不同配比組方對(duì)不同2型糖尿病(T2DM)模型小