藏藥塞北紫堇總生物堿有效部位研究.pdf

1、目的:建立塞北紫堇總生物堿有效部位制備方法，分離總生物堿中化學(xué)成分，采用分離得到的化合物作為質(zhì)量控制指標(biāo)，測定總生物堿有效部位中化合物的含量，采用總生物堿有效部位開展抗癌實(shí)驗(yàn)研究，完善藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為塞北紫堇總生物堿有效部位新藥開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
　　方法:采用堿性乙醇提取制備粗提物，通過精制工藝制備總生物堿含量高于50％的有效部位;采用硅膠柱和重結(jié)晶分離法從總生物堿有效部位中分離單體化合物，并進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定;采用分離得到的化合物作為質(zhì)

2、量控制指標(biāo)，對總生物堿有效部位進(jìn)行含量測定，建立總生物堿有效部位含量測定方法;采用總生物堿有效部位進(jìn)行抗癌實(shí)驗(yàn)研究，明確藥理活性;建立塞北紫堇藥材中原阿片堿含量測定方法，完善藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
　　結(jié)果:1.建立了塞北紫堇總生物堿的制備方法，藥材用堿性乙醇提取、濃縮干燥，得到粗提取物，粗提取物經(jīng)過1％的鹽酸溶液溶解濾過，濾液再用10％氫氧化鈉堿液調(diào)節(jié)pH至10，采用二氯甲烷進(jìn)行萃取制備塞北紫堇總生物堿，再經(jīng)硅膠柱進(jìn)一步純化后得到含量大

3、于50％的總生物堿有效部位。
　　2.對塞北紫堇總生物堿有效部位進(jìn)行了化學(xué)成分分離研究，通過硅膠柱層析和重結(jié)晶法分離總生物堿中化學(xué)成分，共得到5種單體化合物。在結(jié)構(gòu)鑒定中根據(jù)其理化性質(zhì)及ID-NMR、ESI-MS等波譜方法，共鑒定出5種化合物，包括原阿片堿、α-比枯枯靈、黃紫堇明堿、β-hydrastine、β-比枯枯靈，其中α-比枯枯靈、原阿片堿、β-hydrastine是首次從該藥材分離得到。
　　3.對總生物堿有效部位

4、進(jìn)行原阿片堿、黃紫堇明堿、α-比枯枯靈三種化學(xué)成分的含量測定研究，通過方法學(xué)實(shí)驗(yàn)考察，結(jié)果本法簡單可行，方法重現(xiàn)性好，可以作為總生物堿有效部位質(zhì)量控制方法，采用本方法對總生物堿有效部位進(jìn)行含量測定，結(jié)果原阿片堿、黃紫堇明堿和α-比枯枯靈含量總和為33％。
　　4.對塞北紫堇總生物堿有效部位進(jìn)行了體外抗腫瘤活性篩選研究，選取的細(xì)胞瘤株分別是人前列腺癌細(xì)胞，乳腺癌細(xì)胞，胃癌細(xì)胞，肺腺癌細(xì)胞，卵巢癌細(xì)胞。結(jié)果顯示總生物堿有效部位含藥血清

5、對乳腺癌、肺腺癌細(xì)胞有顯著抑制作用。表明塞北紫堇總生物堿具有一定的抗腫瘤活性，但其量效關(guān)系不明確，有待后期深入研究。
　　5.增加了塞北紫堇藥材水分、灰分、酸不溶性灰分和浸出物檢查項(xiàng)，修訂了鑒別項(xiàng)，建立了藥材中原阿片堿含量測定方法，結(jié)果顯示原阿片堿在10.45μg/ml～104.5μg/ml范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，R=0.9997;加樣回收率為98.73％，RSD=1.06％。本法簡單可行，方法重現(xiàn)性好，可以作為塞北紫堇藥材質(zhì)量控