小鼠和豬胚胎玻璃化冷凍保存及其相關(guān)技術(shù)的研究.pdf

1、　　本試驗以小鼠和豬的囊胚為試驗材料，對其玻璃化冷凍保存體系進行了研究。試驗內(nèi)容包括：1)小鼠囊胚和擴張囊胚的玻璃化冷凍保存的研究；2)小鼠囊胚和擴張囊胚冷凍后線粒體聚集的研究；3)豬超數(shù)排卵的研究；4)豬囊胚和擴張囊胚的玻璃化冷凍保存的研究。本試驗通過小鼠胚胎的玻璃化冷凍保存及冷凍后線粒體聚集的研究，旨在為豬胚胎的冷凍保存進行初步的探索，也為豬胚胎玻璃化冷凍保存的研究積累經(jīng)驗并提供借鑒。研究結(jié)果如下： 1.小鼠囊胚和擴張囊胚的

2、玻璃化冷凍保存的研究　　結(jié)果表明：胚胎在玻璃化液中平衡20S存活率顯著高于平衡60S后的存活率(P＜0.05)。V1和V2玻璃化冷凍溶液對囊胚冷凍后的發(fā)育率沒有顯著的影響(P＞0.05)。蔗糖四步法解凍后的發(fā)育率與蔗糖三步法冷凍解凍后的發(fā)育率差異不顯著(P＞0.05)，但兩種方法均顯著高于蔗糖兩步法解凍后的發(fā)育率(P＜0.05)。冷凍方法冷凍對解凍后胚胎的體外發(fā)育率有一定的影響。在OPS三步法冷凍過程中，平衡時間對胚胎冷凍后的發(fā)育率有

3、一定的影響。此外，試驗還比較了冷凍階段對胚胎冷凍后發(fā)育率的影響。 2.小鼠胚胎線粒體聚集的研究　　結(jié)果表明無論是用V1溶液還是用V2溶液對胚胎進行玻璃化冷凍，隨著培養(yǎng)時間的延長，線粒體的正常聚集率均呈現(xiàn)出逐步下降的趨勢。 3.豬超數(shù)排卵影響因素的研究　　結(jié)果表明，北京黑豬超排后的黃體數(shù)顯著高于大白豬和長白豬的黃體數(shù)(P＜0.01)，長白豬超排后的黃體數(shù)顯著高于大白豬的黃體數(shù)(P＜0.05)。在可用胚胎方面，北京黑豬