一種新型造血相關轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子EDAG的功能及作用機制研究.pdf

1、EDAG是作者實驗室自行分離克隆的一種特異表達于造血組織和細胞的新基因。前期研究表明EDAG可促進造血細胞的增殖并抑制分化，并且具有轉(zhuǎn)化活性，提示其可能參與造血發(fā)育調(diào)控及白血病的發(fā)生。本研究對EDAG功能進行了深入研究。首先，EDAG在IL-3依賴細胞株Ba/F3中的過表達，可使細胞在IL-3撤除條件下存活增多，細胞抗凋亡能力增強并伴隨多種抗凋亡相關蛋白表達的上調(diào)；其中NF-κB的活化是EDAG促使細胞抗凋亡能力增強的主要原因，PI3k

2、通路參與了EDAG對NF-κB的活化過程。其次，利用CD11a啟動子制備了EDAG特異表達于造血細胞的轉(zhuǎn)基因小鼠，并對小鼠的表型進行了全面分析。發(fā)現(xiàn)EDAG在小鼠造血細胞中的過表達影響了多種類型造血細胞的發(fā)育與分化，主要表現(xiàn)為：小鼠髓系造血增強，出現(xiàn)骨髓增生性疾病特征；T、B淋巴細胞發(fā)育受阻；造血干細胞數(shù)量增多，分化能力下降；DC細胞比例增多等。分析還發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因小鼠骨髓細胞中多種造血相關基因的表達發(fā)生改變。該結果表明EDAG是造血調(diào)控過

3、程中的關鍵調(diào)節(jié)分子。利用酵母及哺乳動物系統(tǒng)發(fā)現(xiàn)EDAG具有轉(zhuǎn)錄激活活性，EDAG相互作用蛋白THAP11及蛋白激酶C(PKC)激活劑PMA對EDAG的轉(zhuǎn)錄活性具有明顯的增強作用?；赥HAP11是一種DNA結合蛋白，我們認為EDAG/THAP11相互作用可能形成一種新型轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)復合物，磷酸化修飾可能是其發(fā)揮轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)活性的重要調(diào)節(jié)方式。 綜合以上結果，我們認為：EDAG基因是一種新型轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，參與了造血細胞凋亡與造血系統(tǒng)發(fā)育的