單核-巨噬細胞Ly6Clow亞群在心肌梗死后瘢痕形成期的抗炎特性研究.pdf

1、背景及目的:
　　70多年來，白細胞在心梗后的募集、活化、炎癥調(diào)控方面不斷被研究，研究者逐漸認識到，炎癥反應是心梗后預防心功能惡化衰竭而調(diào)控的核心。
　　單核巨噬細胞是心肌梗死后重要的炎癥調(diào)控細胞，具有促炎與抑炎的雙向功能。在小鼠心臟中可以檢測到Ly6Chigh和Ly6Clow兩個單核/巨噬細胞亞群。諸多研究提示，Ly6Clow單核細胞亞群可能是一群特異性的效應細胞，在心梗修復期發(fā)揮積極的抑制炎癥和促進瘢痕修復的作用。

2、>　　本研究擬從心肌缺血再灌注動物模型構建，微觀到細胞與分子水平，進一步研究Ly6Clow單核/巨噬細胞亞群在心肌梗死后的炎癥調(diào)控作用;并結合IRAK-M分子的研究現(xiàn)狀，通過磁珠分選與流式細胞儀的方法對采集細胞進行分選、鑒定，進一步嘗試對IRAK-M分子與Ly6Clow單核/巨噬細胞亞群在心梗后炎癥抑制作用上的關系做出探索。上述研究將有助于闡明Ly6Clow單核細胞亞群的心臟保護作用，尋找心肌梗死后促進心臟愈合的特異性靶細胞和相應機制，

3、為改善心肌梗死的預后提供新治療靶點的研究方向。
　　方法:
　　本研究以心梗后7日取得的小鼠心臟制備單細胞懸液，通過磁珠分選與流式細胞儀的方法對其加以分離、鑒定，通過急性心梗（缺血再灌注）模型與未手術、IRAK-M基因敲除與野生型的雙重對照（具體分組見下表），探索心梗后這一特定階段的炎癥調(diào)控機制。
　　表1實驗動物分組情況（除去手術相關死亡動物數(shù)量）┏━━━━━━━━━┳━━━━━┳━━━━━━┓┃實驗動物/只┃心梗┃

4、未心梗┃┣━━━━━━━━━╋━━━━━╋━━━━━━┫┃基因敲除組┃6┃5┃┣━━━━━━━━━╋━━━━━╋━━━━━━┫┃野生型組┃5┃5┃┗━━━━━━━━━┻━━━━━┻━━━━━━┛
　　結果:
　　本研究發(fā)現(xiàn)，IRAK-M基因敲除組小鼠中，心梗組較未心梗組CD11 b+F4/80-單核細胞數(shù)量顯著性增加，而其他組間細胞數(shù)量比較均無顯著性差異。
　　另外，在CD11b+F4/80+的巨噬細胞或者CD11b+

5、F4/80-的單核細胞中，心梗小鼠IRAK-M基因敲除組較野生型組的Ly6Clow細胞亞群比例顯著減少。野生型小鼠的心梗組與未心梗組相比，Ly6Clow單核細胞比例顯著增高。
　　在各組間對比，M2型細胞總數(shù)量未達到顯著性差異，同時在Ly6Chigh巨噬細胞中，M2型所占比例各組間無顯著差異。而在Ly6Clow巨噬細胞中，IRAK-M基因敲除小鼠心梗組較未心梗組M2型巨噬細胞所占比例顯著增多，心梗小鼠IRAK-M基因敲除組較野生型

6、組M2型巨噬細胞所占比例顯著減少。
　　本研究發(fā)現(xiàn)，在Ly6Clow巨噬細胞中，心梗小鼠IRAK-M基因敲除組與野生型組相比較，IL-1RⅡ表達顯著減低，同時在Ly6Clow單核細胞中，心梗小鼠IRAK-M基因敲除組與野生型組相比較，IL-1RⅡ表達亦顯著減低。
　　結論:
　　IRAK-M在心梗后的炎癥抑制環(huán)境中，能夠調(diào)控單核/巨噬細胞的表型與功能，與Ly6Clow單核/巨噬細胞的數(shù)量與功能密切相關。同時，IRAK-