RGC32基因在心肌梗死后心肌纖維化過程中的作用.pdf

1、心肌梗死(myocardialinfarction，MI)是因冠狀動(dòng)脈或其分支狹窄或者阻塞而引起的缺血性心肌病。心肌組織持續(xù)性缺血缺氧引起局部心肌細(xì)胞變性而喪失功能，殘存的心肌細(xì)胞發(fā)生代償性肥大，心室腔擴(kuò)大，梗死區(qū)室壁變薄，可導(dǎo)致心肌纖維化和左心室重構(gòu)，最終可能導(dǎo)致心力衰竭。心肌纖維化（myocardialfibrosis，MF）是多種心臟心血管疾病過程中較普遍的病理過程，是心肌梗死后左心室重構(gòu)的關(guān)鍵。此外，由于心肌組織持續(xù)性缺血缺氧可

2、引起局部心肌細(xì)胞變性、壞死或者凋亡，并伴隨著各種炎性細(xì)胞的浸潤。同時(shí)，成纖維細(xì)胞被激活、增殖并轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞，Ⅰ/Ⅲ型膠原的比例失調(diào)，心肌的收縮和舒張功能發(fā)生障礙，引起心肌纖維化、左心室重構(gòu)等，最終可能導(dǎo)致心力衰竭，嚴(yán)重威脅著人類的健康和生命。
　　RGC32(Responsegenetocomplement-32)基因是重要的補(bǔ)體應(yīng)答基因，在胎盤、胰腺、腎臟、骨骼肌、肝臟等正常組織中表達(dá)比較高，在心臟、腦組織中次之，而肺組織

3、細(xì)胞中表達(dá)較少。RGC32基因在補(bǔ)體介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)、細(xì)胞周期調(diào)控、腫瘤轉(zhuǎn)移、組織細(xì)胞的增殖分化以及纖維化過程中起著非常重要的作用。因此，本研究用實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的RGC32基因敲除小鼠和相關(guān)技術(shù)平臺，復(fù)制了小鼠心肌梗死模型，以探索RGC32基因在心肌梗死后心肌纖維化過程中的作用。
　　實(shí)驗(yàn)證實(shí)了結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支能造成小鼠心肌梗死，本研究應(yīng)用組織病理學(xué)、熒光定量和心電圖檢測等實(shí)驗(yàn)技術(shù)，比較心肌梗死前后各項(xiàng)指標(biāo)的變化，證實(shí)我們成功復(fù)制了

4、小鼠心肌梗死模型。
　　本研究用1％TTC染色，發(fā)現(xiàn)野生型小鼠在手術(shù)后心肌梗死的面積大于RGC32基因敲除小鼠;利用TUNEL染色法和流式細(xì)胞技術(shù)，發(fā)現(xiàn)RGC32基因敲除小鼠在心肌梗死手術(shù)后和體外誘導(dǎo)的條件下，其心肌細(xì)胞凋亡明顯減少。
　　運(yùn)用免疫組織化學(xué)和Masson'sTrichrome等染色方法，發(fā)現(xiàn)RGC32基因敲除小鼠在心肌梗死后不同時(shí)間點(diǎn)分泌的膠原減少;用Westernblot的方法檢測RGC32基因敲除小鼠在心