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文檔簡介
1、目的:探討小鼠哮喘模型CCR4/TARC信號軸對Treg/Th17細胞向肺內浸潤的調控。
方法:將20只雌性BALB/C小鼠根據隨機數據表分為哮喘組和對照組,每組10只。哮喘組用雞卵清蛋白(OVA)致敏,并以雞卵清蛋白(OVA)激發(fā)建立哮喘小鼠模型;對照組用等量的磷酸鹽緩沖液(PBS)替代致敏和激發(fā)。每組小鼠均于末次激發(fā)后24小時內收集外周血、血清和BALF;取左肺組織行HE染色,對氣道炎癥進行半定量評分;分離右肺組織淋巴細胞
2、;用流式細胞術分別檢測外周血和肺內Treg和Th17細胞的比例變化及CC趨化因子受體4(CCR4)的表達情況;ELISA法檢測血清和BALF中IL-17A、TARC的濃度。
結果:哮喘小鼠肺組織病理結果提示支氣管粘膜增厚,并有斷裂、不完整;支氣管和血管周圍炎性細胞浸潤明顯,基底膜、肺間質和肺泡壁均有增厚,部分肺泡結構破壞;對照組則無此改變。哮喘組小鼠肺內Treg占CD4+T淋巴細胞比例(4.54%±2.68%)低于對照組(11
3、.54%±1.80%),差異有統(tǒng)計學意義(p<0.01);哮喘組肺內Th17細胞占CD4+T淋巴細胞比例(2.58%±0.43%)高于對照組(0.76%±0.15%),差異有統(tǒng)計學意義(p<0.01)。在外周血中,Treg占CD4+T淋巴細胞的比例哮喘組(3.73%±0.58%)低于對照組(10.05%±2.43%),差異有統(tǒng)計學意義(p<0.01); Th17細胞占CD4+T淋巴細胞的比例哮喘組(2.12%±0.69%)高于對照組(0
4、.93%±0.41%),差異有統(tǒng)計學意義(p<0.01)。在肺組織中,CCR4在Treg中的表達分別是:哮喘組96.78%±1.18%、對照組96.50%±2.07%,差異無統(tǒng)計學意義(p=0.76); CCR4在Th17細胞中的表達為:哮喘組96.48%±1.72%、對照組96.18%±2.52%,差異無統(tǒng)計學意義(p=0.77)。而在外周血中,CCR4在Treg中的表達分別為:哮喘組96.07%±2.05%、對照組96.60%±1.
5、97%,差異無統(tǒng)計學意義(p=0.487); CCR4在Th17細胞中的表達分別為:哮喘組96.70%±1.61%、對照組96.98%±2.13%,差異無統(tǒng)計學意義(p=0.653)。IL-17A在血清和BALF中的濃度均呈低水平,組間差異無統(tǒng)計學意義;兩組血清中TARC的濃度均呈低水平,差異無統(tǒng)計學意義;兩組BALF中TARC的的濃度分別為哮喘組108.27±62.16 pg/ml、對照組41.07±18.95 pg/ml,差異有統(tǒng)計
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