ALK1在小鼠胰腺中的表達與定位研究.pdf

1、胰腺是重要的消化和內分泌器官，分為外分泌部和內分泌部兩部分。外分泌部由腺泡和導管組成，其分泌的胰液有重要的消化作用。散布在腺泡之間的胰島(isletofLangerhans)構成內分泌部，可分泌多種激素。成熟胰島主要含有α細胞、β細胞、δ細胞、γ細胞四種細胞類型，分別分泌胰高血糖素(glucagon)、胰島素(insulin)、生長抑素(somatostatin)和胰多肽(pancreaticpolypeptide)，它們對體內的糖代謝

2、和血糖平衡發(fā)揮重要的調控作用。 近年來，由于糖尿病、胰腺癌等胰腺疾病在世界范圍內的發(fā)病率不斷上升，有關胰腺發(fā)育的分子調控機制的研究越來越受關注。胰腺的發(fā)育是一個高度協(xié)調的過程，受到多種信號通路的共同調控。Transforminggrowthfactor-β(TGF-β)信號通路是其中一類重要的調控通路。迄今為止，已經有大量文獻報道該信號通路在胰腺發(fā)育和胰腺疾病中的調控作用，但是其中的具體作用機制至今還不清楚。ALK1(acti

3、vinreceptor-likekinase1；ACVRL1)是TGF-β信號通路中的一種Ⅰ型單跨膜絲氨酸/蘇氨酸激酶受體。在TGF-β信號通路中，能夠與TGF-β1或TGF-β3結合，通過活化某些Smads蛋白傳遞信號?，F有研究發(fā)現ALK1主要表達于內皮細胞，參與調控血管發(fā)生發(fā)育過程。至今尚無關于它在胰腺細胞中表達的任何報道。我們認為，從TGF-β信號通路的重要受體——ALK1著手進行研究，對于進一步認識該信號通路在胰腺發(fā)育調控中的作

4、用途徑和機理尤為重要。 本實驗以C57BL/6J小鼠12.5天-16.5天，18.5天的胚胎、新生和出生后5周的小鼠為研究材料，制作石蠟切片，通過免疫組織化學染色和免疫熒光共定位技術，用抗體Rabbitpolyclonalanti-acvrl1和Polyclonalguineapiganti-swineinsulin檢測并定位基因alk1在小鼠胰腺中的表達和發(fā)育變化。 結果顯示，ALK1在小鼠胚胎12.5天的胰腺中沒

5、有表達，13.5-16.5天、18.5天、新生及出生5周時均在胰腺中有特異性表達，且表達量隨著胰腺發(fā)育階段的變化而逐漸增多；共定位分析顯示ALK1與INSULIN表達位置基本一致。 為了進一步確定上述實驗結果，我們用另一種ALK1抗體Rabbitpolyclonalanti-TGFβRI(V-22)與Polyclonalguineapiganti-swineinsulin共染新生小鼠的胰腺組織切片，免疫熒光共定位結果顯示，二者