節(jié)旋藻形態(tài)建成相關(guān)蛋白（SMR1）的分子特征及抗體制備.pdf

1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文節(jié)旋藻形態(tài)建成相關(guān)蛋白（SMR1）的分子特征及抗體制備姓名：陳曉燕申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物物理學(xué)指導(dǎo)教師：汪志平20060501際需要。奪研究應(yīng)用轉(zhuǎn)基因原核表達策略，通過對目的蛋白誘導(dǎo)溫度與時間等表達條件優(yōu)化，并應(yīng)用鎳親和層析等分離搜術(shù)獲得了足量、電泳純的SMRj產(chǎn)物。其中，所構(gòu)建的表達頃粒中目的蛋白誘導(dǎo)表達的適宜溫度為25～30℃、時問為612h。同時，進～步以原核表達所獲得的SMRl為抗原，通過免疫黑眼純種新

2、西蘭兔制備抗體。菇進行了4次免疫，每次免疫的蛋白量依次為】、05、O5和O5mg。晟后一次免疫結(jié)束兩同后，頸動脈放血并收集血清。通過間接EI_，ISA捌Westernblot對所制抗體的特異性和效價等分析表明，效價高達1：51200，日均能與原核表達的SMRl，以及節(jié)旋藻中的SMRl發(fā)生免疫反應(yīng)。這說明所制備SMRl抗體的效價高、特異性好，從而為進一步利用免疫共沉淀、蛋白質(zhì)互作、蛋向質(zhì)芯片等技術(shù)深入研究并揭示SMR1對節(jié)旋藻形態(tài)建成的生