IRG47蛋白的表達(dá)及多克隆抗體制備.pdf

1、IRG(Immunity-related GTPases)是干擾素γ誘導(dǎo)的免疫相關(guān)GTP蛋白，最先在脊椎動物中被發(fā)現(xiàn)。IRG蛋白在調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)的病原體先天的抵抗力有著很重要的作用。在動物感染了細(xì)菌、原生動物和病毒的時(shí)候或者干擾素誘導(dǎo)，IRG蛋白表達(dá)量會升高。IRG蛋白在老鼠、兔子、狗、斑馬魚和人中都有表達(dá)。其中已經(jīng)有研究表明，老鼠IRG蛋白在抵抗病原體和細(xì)菌作用上起到很重要的作用。IRG47屬于IRG蛋白家族成員，但I(xiàn)RG47蛋白的性質(zhì)和

2、功能還沒有被研究。
　　本文構(gòu)建了IRG47的表達(dá)載體，通過免疫熒光共聚焦顯微技術(shù)，發(fā)現(xiàn)過表達(dá)的IRG47具有明顯的囊泡結(jié)構(gòu)，進(jìn)一步研究表明IRG47主要分布在脂滴表面，而不是高爾基體，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。本文還利用重組表達(dá)的GST-IRG47免疫新西蘭大白兔制備多克隆抗體，經(jīng)免疫熒光顯微技術(shù)和western-blot等方法，證明所制備IRG47抗體可以特異性識別內(nèi)源、外源的IRG47。利用所制備的抗體檢測IRG47在小鼠組織中的表達(dá)情況，發(fā)