類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者外周血miR-146a、miR-155與Ets-1、IRAK1的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、目的:
　　研究類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthiritis，RA）患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中miR-146a、miR-155與Ets-1、IRAK1和血漿中炎癥因子的表達(dá)水平，同時(shí)結(jié)合臨床指標(biāo)分析以上因子及與RA病情的相關(guān)性，初步探討上述幾種因子在RA發(fā)病過(guò)程中的作用。
　　方法:
　　收集2015年9月至2016年5月在南方

2、醫(yī)院中醫(yī)科住院RA患者44例，其中男性6例，女性38例。根據(jù)患者的病情活動(dòng)度分為高活動(dòng)組23例，其中男性4例，女性19例;低活動(dòng)組21例，其中男性2例，女性19例。所有RA患者均符合2010年美國(guó)風(fēng)濕學(xué)會(huì)(ACR)聯(lián)合歐洲抗風(fēng)濕聯(lián)盟(EULAR)修訂的RA分類標(biāo)準(zhǔn)。健康對(duì)照組為同期在南方醫(yī)院體檢科的體檢者22例，其中男性6例，女性16例。兩組在年齡及性別構(gòu)成方面的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)分離的PB

3、MCs中的miR-146a、miR-155及Ets-1、IRAK1mRNA的相對(duì)表達(dá)水平，同時(shí)ELISA檢測(cè)血漿中Ets-1和IRAK1的蛋白水平，檢測(cè)血漿中TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-17、IL-21的水平，并與DAS28、CRP、ESR、RF、抗CCP、Hb、總補(bǔ)體等進(jìn)行相關(guān)性分析。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用t檢驗(yàn)，非參數(shù)檢驗(yàn)，單因素方差分析，Pearson、Spearman相關(guān)分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

4、r>　　結(jié)果:
　　miR-146a、miR-155在RA患者PBMCs中的相對(duì)表達(dá)水平顯著高于健康對(duì)照組(P＜0.05)，高活動(dòng)組的表達(dá)水平明顯高于低活動(dòng)組(P＜0.05)、低活動(dòng)組和健康對(duì)照組比較未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);RA患者PBMCs的Ets-1mRNA相對(duì)表達(dá)水平與健康對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），但高活動(dòng)組中的相對(duì)表達(dá)水平顯著低于低活動(dòng)組和健康對(duì)照組(P＜0.05)，低活動(dòng)組與健康對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P

5、＞0.05);RA患者中的IRAK1mRNA相對(duì)表達(dá)水平明顯低于健康對(duì)照組(P＜0.05)，高活動(dòng)組顯著低于健康對(duì)照組(P＜0.01)、低活動(dòng)組顯著低于健康對(duì)照組(P＜0.05)，而高活動(dòng)組與低活動(dòng)組之間未發(fā)現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。Ets-1、IRAK1在RA血漿中的蛋白表達(dá)水平與健康對(duì)照者無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。ELISA檢測(cè)發(fā)現(xiàn)TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-21的蛋白表達(dá)水平在RA患者血漿中表達(dá)增高的，而IL

6、-2、IL-17在RA患者與健康對(duì)照者的血漿中無(wú)明顯變化。相關(guān)性分析顯示miR-155的表達(dá)水平與血沉正相關(guān)(r=0.319，P=0.042)，與Hb成負(fù)相關(guān)(r=-0.386，P=0.017);Ets-1與CRP負(fù)相關(guān)（r=-0.408，P=0.007）;IRAK1與RF、DAS28、總補(bǔ)體負(fù)相關(guān)(r=-0.513，P=0.001;r=-0.332,P=0.029;r=-0.49,P=0.015)。
　　結(jié)論:
　　此次研

7、究發(fā)現(xiàn)RA患者PBMCs的miR-146a、miR155相對(duì)表達(dá)水平增高，提示miR146a、miR155參與RA的發(fā)病，可能成為RA高活動(dòng)的診斷標(biāo)志物;Ets-1、IRAK1相對(duì)表達(dá)水平降低，可能參與RA的調(diào)控;RA患者血漿中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-21炎癥因子表達(dá)明顯增高，可能在RA發(fā)病中扮演重要角色，TNF-α、IL-6與CRP、ESR、CRP呈正相關(guān)，對(duì)病情活動(dòng)的判斷有一定的參考意義。由于本研究樣本量有限，miR