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1、目的:
探討1,25-二羥維生素D3對(duì)實(shí)驗(yàn)性IgA腎病大鼠中IL-17、RORγt的調(diào)節(jié)作用。
方法:
選用Wistar大鼠52只,隨機(jī)選取44只Wistar大鼠,通過采用抗原直接刺激食管粘膜內(nèi)皮細(xì)胞后激活巨噬細(xì)胞的方法來制得IgA腎病模型。正常對(duì)照組選取8只給予同等量生理鹽水灌胃及皮下與尾靜脈注射。
于實(shí)驗(yàn)第5周將造模組大鼠取兩只,殺鼠行病理學(xué)檢查,經(jīng)鑒定成功后,剔除死亡大鼠,剩余IgAN大鼠分
2、為IgA腎病組(B組)、l,25(OH)2D3治療組(C組)、強(qiáng)的松治療組(D組)及強(qiáng)的松+ l,25(OH)2D3聯(lián)合治療組(E組);C、D、E組分別每日灌喂l,25(OH)2D3(3ng/100g)、強(qiáng)的松(10mg/kg)、強(qiáng)的松+ l,25(OH)2D3(劑量同前),A組與正常組(B組)每日灌喂同等量蒸餾水,共7周。
治療7周后檢測(cè)各組大鼠24小時(shí)尿蛋白定量、尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、肌酐、血鈣的改變,并用RT-PCR方法檢測(cè)脾臟
3、中RORγt、IL-17 mRNA的水平;免疫組化及Western blot檢測(cè)腎臟中RORγt的變化。
結(jié)果:
(1) B組( IgA腎病組)的24小時(shí)尿蛋白定量為49.37±2.96mg/24h;C組(l,25(OH)2D3治療組)的24小時(shí)尿蛋白定量為21.05±2.06mg/24h;D組(強(qiáng)的松組)的24小時(shí)尿蛋白定量為15.26±1.57mg/24h;E組(強(qiáng)的松+ l,25(OH)2D3治療組)的24小時(shí)
4、尿蛋白定量為10.16±1.39 mg/24h;A組(正常對(duì)照組)的24小時(shí)尿蛋白定量為7.27±0.86 mg/24h。各組在治療前后的變化均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05),其中E組(強(qiáng)的松+ l,25(OH)2D3治療組)下降最顯著,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。
(2) B組(IgA腎病組)的尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)為328±7.04個(gè)/μL;C組(l,25(OH)2D3治療組)的尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)為162±5.36個(gè)/μL;D組(強(qiáng)的
5、松組)的尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)為18±3.06個(gè)/μL;E組(強(qiáng)的松+l,25(OH)2D3治療組)的尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)為9±3.15個(gè)/μL;A組(正常對(duì)照組)的尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)為5.03±2.55個(gè)/μL。B組(模型組)較A、C、D、E組尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著升高(p<0.05);經(jīng)治療后各組尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)均有顯著下降(p<0.05),其中E組(強(qiáng)的松+ l,25(OH)2D3治療組)下降最顯著,較C、D組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05)。
(3) B組
6、(IgA腎病組)的RORγtmRNA和IL-17mRNA的水平的相對(duì)含量分別為0.8413±0.0013、0.7431±0.0019;C組( l,25(OH)2D3治療組)的為0.6617±0.0018、0.5942±0.0021;D組(強(qiáng)的松組)的為0.5901±0.0008、0.4531±0.0010;E組(強(qiáng)的松+ l,25(OH)2D3治療組)的為0.3822±0.0007、0.2897±0.0023;A組(正常對(duì)照組)的為0.
7、1897±0.0010、0.1342±0.0016。B組(模型組)較A、C、D、E組上述指標(biāo)均顯著升高(p<0.05);經(jīng)治療后各組以上指標(biāo)均有顯著下降(p<0.05),其中E組(強(qiáng)的松+l,25(OH)2D3治療組)下降最顯著,較C、D組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05)。
(4) B組(IgA腎病組)中RORγt的相對(duì)含量為0.2871±0.0006;C組(l,25(OH)2D3治療組)中RORγt的相對(duì)含量為0.1741±0.
8、0008;D組(強(qiáng)的松組)中RORγt的相對(duì)含量為0.1286±0.0008;E組(強(qiáng)的松+ l,25(OH)2D3治療組)中RORγt的相對(duì)含量為0.0945±0.0004;A組(正常對(duì)照組)中RORγt的相對(duì)含量為0.0233±0.0002。B組(模型組)較A、C、D、E組RORγt的相對(duì)含量顯著升高(p<0.05);經(jīng)治療后各組中RORγt的蛋白相對(duì)含量均有顯著下降(p<0.05),其中E組(強(qiáng)的松+l,25(OH)2D3治療組)
9、下降最顯著,較C、D組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05)。
(5) B組(IgA腎病組)中RORγt的蛋白相對(duì)含量為0.907±0.001;C組(1,25(OH)2D3治療組)中RORγt的蛋白相對(duì)含量為0.682±0.001;D組(強(qiáng)的松組)中RORγt的蛋白相對(duì)含量為0.546±0.002;E組(強(qiáng)的松+ l,25(OH)2D3治療組)中RORγt的蛋白相對(duì)含量為0.405±0.005;A組(正常對(duì)照組)中RORγt的蛋白相對(duì)含
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