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1、碩士學(xué)位論文重組人血清白蛋白在漢遜酵母中的表達(dá)與純化ExpressionandPurificationofRecombinantHumanSerumAlbumininHansenulapolymorpha作者姓名:孟且紅學(xué)科、專業(yè):生物生匕王學(xué)號(hào):5蛆18Q籃指導(dǎo)教師:包丞盟副茲授完成日期:2Q逝璽11耳12目大連理工大學(xué)DalianUniversityofTechnology重組人血清白蛋白在漢遜酵母中的襲達(dá)與純化Expression
2、andPurificationofRecombinantHumanSerumAlbumininHansenulapolymorphaAbstractHumanserumalbumin(HSA)playsallimportantroleinclinicaltherapyAtpresent,HSApreparedfromhumanplasmaislimitedinsupplyandthereisthepotentialriskofconta
3、minationoftheproductbyblooddrivedpathogensItisofgreatsignificancetoproductrecombinantHSAbygeneticengineeringmeansHansenulapolymorphaaSwellasPichiapastorisiscapableofgrowingwitllmethanolasitssolecarbonandenergysourceBased
4、onHansenulapolymorpha警geneticcodonusagebias,theoptimizedgeneofHSAwassynthesizedandclonedintoHansenulapolymorphaexpressionvectorpDGXMPTl0toconstructrecombinantHSA(rHSA)expressionplasmidAftertransformedintoHansenulapolymor
5、phastrainbyelectropomtionthetransformantswerescreenedonMDmediumforURA3pheno一typeThehighexpressionstrainwasselected瓠themethodsofSDSPAGEandWesternblottingFed—batchfermentationprocess、wasexploredina30L—fermenter硪曲estexpress
6、ionlevelof10339/Lwasachievedat61一hpostinducton,whereaftertheproteolyticdegradationofrHSAturnedobviouslyTheconcentrationofrHSAdecreasedtoalowlevel150hafterinductionTherHSAWaSpurifiedbystreamlineSPexchangechromatography、ph
7、enylBiosep6FFhydrophohicinteractionchromatographyandDEAEsepharoseexchangechromatographyElectrophoresis—gradeproteinWasobtainedDilutingthepurifiedproteintoappropriteconcentration,weimmunizedseveralgroupofmiceandserawereco
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