重組人Hexastatin蛋白在大腸桿菌中的可溶性表達及蛋白純化.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、血管發(fā)生是從已有的血管中形成新生的管道，它對于生物體內很多正常的生理過程來說是至關重要的。1971年Folkman提出了著名的“腫瘤饑餓療法”，即腫瘤的生長和轉移離不開新生血管的形成，氧氣從血管中擴散的最大限值是150μm，通過抑制腫瘤新生血管的形成，阻斷腫瘤細胞賴以生存的氧氣及營養(yǎng)供給，腫瘤細胞便會發(fā)生凋亡。此學說的提出為腫瘤的生物治療提供了新的策略，尋找內源性的血管生成抑制因子成為近年來研究的熱點。
　　 Hexastati

2、n來源于細胞外基質，是Ⅳ型膠原蛋白α6鏈的非膠原區(qū)NC1，由229個氨基酸組成，分子量是25 kD。近年來研究表明Hexastatin可以通過一種RGD非依賴方式與整合素分子αvβ3結合，調節(jié)內皮細胞的黏附和遷移，并且劑量依賴性地抑制內皮細胞的增殖，對新生血管的生成起到顯著的抑制作用。另外，實體瘤實驗證實Hexastatin還能有力地抑制腫瘤細胞的生長，它在癌組織中含量的下調可以作為腫瘤浸潤的重要指標，起到提前預警的作用。
　　

3、 本研究從人食管癌EC9706細胞中克隆出Hexastatin基因，在大腸桿菌中進行了可溶性表達，并利用麥芽糖結合蛋白（Maltose Binding Protein，MBP）可專一性結合于直鏈淀粉（Amylose）親和樹脂的特性，對表達產物作了進一步的純化。實驗結果：經PCR擴增成功獲得了687 bp的人Hexastatin基因，測序正確，重組人Hexastatin基因在BL21菌體中獲得了高效可溶性表達，表達的可溶性蛋白占總蛋白量的

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