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文檔簡介
1、目的:
評價葉酸受體介導上皮特殊染色液、腫瘤細胞周期和表達相關(guān)蛋白和HPV E6/E7 mRNA分型檢測在宮頸癌篩查中的應用價值,明確葉酸受體、腫瘤細胞周期和表達相關(guān)蛋白在宮頸病變組織和宮頸脫落細胞中的表達。
方法:
1、對231例門診欲行宮頸癌篩查者,前瞻性行液基細胞學檢查(TCT)、人乳頭瘤病毒檢測(HPV)和葉酸受體介導上皮特殊染色液(FRD)檢查,并以病理診斷為金標準,計算并對比TCT、HPV和FR
2、D的敏感度、特異度等診斷價值指標。
2、通過熒光定量PCR方法,對153例宮頸脫落細胞行HPV DNA分型、HPVE6/E7 mRNA分型,并分析HPV DNA與E6/E7 mRNA檢測的一致性。以47例病理診斷為金標準,計算并對比不同型別HPV DNA陽性者、不同型別HPV E6/E7mRNA陽性者患高級別宮頸上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌的相對危險度(OR)。
3、通過免疫組織化學方法,檢測231例病理組織中葉酸受體、腫瘤細
3、胞周期和表達相關(guān)蛋白的表達,并采用熒光定量PCR,檢測宮頸脫落細胞中葉酸受體、腫瘤細胞周期和表達相關(guān)蛋白mRNA的表達;同時,向?qū)m頸癌細胞株C33A中轉(zhuǎn)染攜帶HPV E6、E7基因的質(zhì)粒,通過Western Blot檢測葉酸受體的表達變化。
結(jié)果:
1、高級別宮頸上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌發(fā)生的平均年齡為40.15±8.03歲。FRD診斷敏感度77.53%,特異度55.63%,與TCT相比無顯著統(tǒng)計學差異。FRD診斷符合率6
4、4.07%,高于HPV和TCT,有顯著統(tǒng)計學差異。FRD使用的小棉簽對宮頸病變的診斷效率較低。與≥ASCUS時診斷TCT異常相比,>ASCUS時診斷TCT異常的診斷效率更高。HPV檢測對CIN2以上病變的陰性預測值為100%。HPV定量(HC2)與HPV分型診斷的敏感度和特異度無顯著統(tǒng)計學差異。
2、HPV16的感染率最高,其次是HPV52、HPV58。HPV E6/E7 mRNA檢測的陽性率與HPV DNA拷貝數(shù)相關(guān)。高危型
5、HPV混合感染和混合低危型HPV感染均不影響HPV E6/E7 mRNA分型檢測。HPV16、18 DNA陽性者發(fā)生CIN2以上病變的風險顯著高于其他類型感染。HPV E6/E7 mRNA陽性者發(fā)生CIN2以上病變的風險顯著高于單純HPV DNA陽性者。HPV16、18型E6/E7 mRNA陽性者,發(fā)生CIN2以上病變風險,顯著高于HPV DNA陽性者和其他型HPV E6/E7 mRNA陽性者。
3、葉酸受體、CREPT在組織
6、病理學診斷的宮頸炎和低級別上皮內(nèi)瘤變中均低表達,在高級別上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌中高表達,且有顯著統(tǒng)計學差異。葉酸受體、CREPT mRNA在不同程度宮頸病變者的脫落細胞中無顯著統(tǒng)計學差異。瞬時轉(zhuǎn)染HPV E6、E7前后,C33A細胞中葉酸受體表達未見變化。
結(jié)論:
1、FRD診斷敏感度和特異度與TCT相比無顯著統(tǒng)計學差異,且診斷符合率高于HPV和TCT。HC2與HPV分型診斷的敏感度和特異度無顯著統(tǒng)計學差異,HPV檢測對
7、CIN2以上病變的陰性預測值極高。
2、HPV E6/E7 mRNA陽性者發(fā)生CIN2以上病變的風險顯著高于單純HPVDNA陽性者。HPV16、18型E6/E7 mRNA陽性者,發(fā)生CIN2以上病變風險,顯著高于單純HPV DNA陽性者和其他型HPV E6/E7 mRNA陽性者。
3、葉酸受體、CREPT在組織病理學診斷的宮頸炎和低級別宮頸上皮內(nèi)瘤變中低表達,在高級別宮頸上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌中高表達。葉酸受體、CREP
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