哺乳動物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)體中FKBP23與BiP結(jié)合行為的研究.pdf

1、FK506結(jié)合蛋白(FK506 binding protein，F(xiàn)KBP)是免疫抑制劑FK506(Tacrolimus)在生物體內(nèi)的天然配體，與另兩類免疫抑制劑Cyclosporin A體內(nèi)的配體親環(huán)素(cyclophiIin CyP)和Rapamycin共同稱為親免素或親免蛋白(Immunophilin)。親免蛋白具有兩大主要特征：一是遺傳上的保守性，二是肽脯氨酰順反異構(gòu)酶(PPIase)活性。FKBP23是1998年在小鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(e

2、ndoplasmicretictdum，ER)中發(fā)現(xiàn)的一個FKBP家族的蛋白質(zhì)。它由一個N端的肽脯氨酰順反異構(gòu)酶結(jié)構(gòu)域和一個C端的含有鈣離子結(jié)合模體的結(jié)構(gòu)域組成。BiP是Hsp70家族在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)體中的成員。在生命體中，蛋白質(zhì)在其生理位置需折疊成具有正常生理功能的空間結(jié)構(gòu)才具有活性。Hsp70家族蛋白在生物體內(nèi)的主要功能是在蛋白質(zhì)于細胞內(nèi)亞細胞結(jié)構(gòu)間轉(zhuǎn)運的過程及其折疊過程中，充當分子伴侶的角色。 我們曾利用免疫沉淀的方法證明小鼠內(nèi)質(zhì)

3、網(wǎng)體中FKBP23與BiP特異性結(jié)合，并受Ca<'2+>濃度影響。在本實驗中我們通過sephadex G-75凝膠色譜法進一步驗證了不論是克隆的還是天然ER中的FKBP23和BiP都有這種受Ca<'2+>濃度影響的特異性結(jié)合行為，同時，通過GFC柱行為，從復(fù)合物對應(yīng)的分子量我們可以知道，在體內(nèi)和體外，F(xiàn)KBP23和BiP都是1：1結(jié)合，即一分子FKBP23和一分子BiP結(jié)合的，這是親和吸附和免疫沉淀方法所無法得知的。 pFKBP