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文檔簡介
1、目的:本研究在維吾爾醫(yī)學(xué)(維醫(yī))體液論的指導(dǎo)下成功建立異常膽液質(zhì)載體潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative colitis,UC)病證大鼠模型,檢測異常膽液質(zhì)載體UC病證模型組和正常組大鼠結(jié)腸組織中IL-1α、IL-1β、iNOS、eNOS等四種炎癥相關(guān)因子的hnRNA和mRNA表達(dá)水平的變化及NF-κB對上述四種炎癥相關(guān)因子基因轉(zhuǎn)錄活性的調(diào)控機(jī)制,從而闡述NF-κB在異常膽液質(zhì)載體UC病證發(fā)生、發(fā)展中的作用機(jī)制。
方法:根據(jù)維醫(yī)
2、體液論建立異常膽液質(zhì)載體證候模型的基礎(chǔ)上,采用TNBS/乙醇法構(gòu)建異常膽液質(zhì)載體UC病證大鼠模型,將動(dòng)物分為正常組和異常膽液質(zhì)載體UC病證模型組,應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)方法檢測兩組大鼠結(jié)腸組織中IL-1α、IL-1β、iNOS、eNOS的hnRNA與mRNA表達(dá)水平,并分析其表達(dá)差異,應(yīng)用染色質(zhì)免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)-qPCR方法,檢測NF-κB與
3、候選基因IL-1α、IL-1β、iNOS、eNOS調(diào)控序列的親和力,闡述存在表達(dá)差異的分子機(jī)制。
結(jié)果:1)異常膽液質(zhì)載體UC病證模型組大鼠體征、癥狀、結(jié)腸粘膜損傷等均符合異常膽液質(zhì)載體UC病證模型的判定標(biāo)準(zhǔn);2)qRT-PCR結(jié)果顯示,與正常組比較,異常膽液質(zhì)載體UC病證模型組大鼠結(jié)腸組織中IL-1α、IL-1β、iNOS的hnRNA表達(dá)水平均上調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而eNOS的hnRNA表達(dá)水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義
4、(P>0.05);與正常組比較,異常膽液質(zhì)載體UC病證模型組大鼠結(jié)腸組織中IL-1α、IL-1β、iNOS、eNOS的mRNA表達(dá)水平均上調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);3)ChIP-qPCR結(jié)果顯示,與正常組比較,異常膽液質(zhì)載體UC病證模型組大鼠結(jié)腸組織中NF-κB增強(qiáng)IL-1α、IL-1β、iNOS基因的轉(zhuǎn)錄活性,而對eNOS基因轉(zhuǎn)錄活性的調(diào)控作用不明顯。
結(jié)論:
1)異常膽液質(zhì)載體UC病證模型組大鼠結(jié)腸組
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