分娩方式對(duì)腸道菌群定植模式及遠(yuǎn)期過敏性疾病發(fā)生率影響的研究.pdf

1、目的：嬰兒期是人類腸道菌群形成的關(guān)鍵時(shí)期，腸道菌群的正常定植和演替對(duì)嬰兒的免疫發(fā)育、營養(yǎng)和代謝至關(guān)重要。目前諸多因素可影響腸道菌群的建立和構(gòu)成，其中分娩方式對(duì)嬰兒腸道菌群的定植是重要影響因素之一。近年來在世界范圍內(nèi)隨著剖宮產(chǎn)率不斷升高，剖宮產(chǎn)是否會(huì)對(duì)兒童健康造成影響受到全社會(huì)普遍關(guān)注。同樣過敏性疾病的發(fā)生率也在持續(xù)不斷升高，除了環(huán)境因素外，腸道菌群結(jié)構(gòu)的變異對(duì)過敏性疾病的發(fā)生也具有一定的影響。本文采用16SrDNA熒光定量 PCR法定量

2、檢測(cè)各組中糞便雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸桿菌和腸球菌數(shù)量，同時(shí)隨訪觀察不同分娩方式對(duì)過敏性疾病發(fā)生率的影響，力圖從腸道菌群微生態(tài)學(xué)方面闡明不同分娩方式對(duì)腸道菌群初始化定植和演替的影響，以及分娩方式通過影響腸道微生態(tài)對(duì)遠(yuǎn)期過敏性疾病發(fā)生率的影響，為今后早期預(yù)防過敏性疾病提供理論依據(jù)。
　　方法：收集2014年01月-2015年12月在河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院和石家莊市第四醫(yī)院產(chǎn)科分娩的符合入選標(biāo)準(zhǔn)的足月母乳喂養(yǎng)健康新生兒80例，其中剖宮產(chǎn)

3、40例，順產(chǎn)40例。剖宮產(chǎn)新生兒40例為A組（實(shí)驗(yàn)組），其中4例在隨訪過程中因依從性差等原因脫落，故實(shí)際例數(shù)為36例，男19例，女17例。順產(chǎn)新生兒40例為B組（對(duì)照組），其中3例在隨訪過程中因依從性差等原因脫落，故實(shí)際例數(shù)為37例，男19例，女18例。所入選對(duì)象均為母乳喂養(yǎng)，無家族過敏史，生后第5個(gè)月添加輔食，所有嬰兒及其雙親均生活在石家莊市或其周邊縣市，氣候、居住環(huán)境和飲食條件等相當(dāng)；并在研究開始前征得家長同意后簽訂知情同意書，取得

4、河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院倫理道德委員會(huì)同意。本研究分兩部分進(jìn)行：臨床指標(biāo)觀察：隨訪記錄新生兒在生后第1個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月和12個(gè)月過敏性疾病發(fā)生情況，觀察不同分娩方式對(duì)嬰兒過敏性疾病發(fā)生率的影響。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)：收集嬰兒生后第1天、3天、7天、1個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月和12個(gè)月的糞便標(biāo)本，采用熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Flurogenic Quantitative Polymerase Chain Reaction,FQ-PCR)測(cè)定糞便中雙歧桿

5、菌(Bifidobacteria)、乳酸桿菌（Lactobacillus）、大腸桿菌（Escherichia coli）和腸球菌（Enterococcus）數(shù)量，了解不同分娩方式對(duì)嬰兒腸道菌群定植和演替的影響。統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS13.0軟件，計(jì)量資料進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)及方差齊性檢驗(yàn)，多樣本均數(shù)比較采取方差分析。計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)。以α=0.05作為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。
　　結(jié)果：
　　1.入選對(duì)象共80例，實(shí)際完成實(shí)驗(yàn)研究的嬰兒73例

6、，脫落嬰兒7例。
　　2.嬰兒腸道菌群動(dòng)態(tài)變化：生后第1天，在A、B組嬰兒糞便中檢測(cè)出大量大腸桿菌、腸球菌和少量雙歧桿菌、乳酸桿菌；第3天時(shí)B組嬰兒糞便中雙歧桿菌數(shù)量成為腸道優(yōu)勢(shì)菌，A組在第7天時(shí)成為腸道優(yōu)勢(shì)菌；隨著輔食添加，在生后第6個(gè)月時(shí)測(cè)得A、B組嬰兒糞便大腸桿菌、腸球菌數(shù)量漸增加，以致達(dá)高峰，后有降低趨勢(shì)；約在生后第12個(gè)月時(shí)A、B組嬰兒腸道菌群結(jié)構(gòu)維持處在相對(duì)穩(wěn)定狀態(tài)。A、B組嬰兒糞便中雙歧桿菌數(shù)量隨時(shí)間推移呈增長趨勢(shì)。

7、B組生后第3天、7天、1個(gè)月和3個(gè)月時(shí)雙歧桿菌數(shù)量均高于A組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；生后第1天、6個(gè)月和12個(gè)月時(shí)A、B組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。A、B組嬰兒糞便中乳酸桿菌數(shù)量隨時(shí)間推移呈增長趨勢(shì)，在第6個(gè)月時(shí)漸下降。B組生后第1天、3天、7天和3個(gè)月時(shí)乳酸桿菌數(shù)量均高于A組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；生后第1個(gè)月、6個(gè)月和12個(gè)月時(shí)A、B組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。A、B組嬰兒糞便中大腸桿菌數(shù)量隨時(shí)間

8、推移呈增長趨勢(shì)，在第6個(gè)月時(shí)達(dá)高峰，之后有所降低；B組生后第1天、3天、7天和3個(gè)月時(shí)大腸桿菌數(shù)量均高于A組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；生后第1個(gè)月、6個(gè)月和12個(gè)月時(shí)A、B組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。A、B組嬰兒糞便B/E值隨時(shí)間推移呈波動(dòng)性變化：B組嬰兒糞便B/E值在生后第3天、7天、1個(gè)月、3個(gè)月和12個(gè)月時(shí)均高于A組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；在生后第1天和6個(gè)月時(shí)，B組嬰兒糞便B/E值與A組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（

9、P>0.05）。
　　3.嬰兒過敏性疾病的發(fā)生率：A、B組嬰兒在隨訪1年期間，未發(fā)現(xiàn)患有變應(yīng)性鼻炎和支氣管哮喘患兒，而濕疹和喘息性支氣管炎發(fā)生率較高。A組嬰兒濕疹發(fā)生率在生后第6個(gè)月和第12個(gè)月兩個(gè)時(shí)間段均高于B組（P＜0.05）；在生后第1個(gè)月和第3個(gè)月兩個(gè)時(shí)間段A組濕疹發(fā)生率高于B組，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。A組嬰兒喘息性支氣管炎發(fā)生率在第12個(gè)月時(shí)高于B組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；在生后第1個(gè)月、3個(gè)月和6個(gè)月

10、三個(gè)時(shí)間段A組喘息性支氣管炎發(fā)生率均高于B組，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.本研究顯示，新生兒腸道菌群的定植和演替是一個(gè)連續(xù)而復(fù)雜的過程，表現(xiàn)在生后第1天糞便中檢測(cè)出大量大腸桿菌、腸球菌和少量雙歧桿菌、乳酸桿菌；生后第3天時(shí)陰道分娩兒腸道中雙歧桿菌成為腸道優(yōu)勢(shì)菌，而剖宮產(chǎn)兒達(dá)優(yōu)勢(shì)化時(shí)間是在第7天。兩組嬰兒均隨著輔食添加后腸道中的大腸桿菌、腸球菌數(shù)量漸增加，在生后第6個(gè)月時(shí)達(dá)高峰，后有下降趨勢(shì)；在生后第

11、12個(gè)月時(shí)兩組嬰兒腸道菌群結(jié)構(gòu)維系在相對(duì)穩(wěn)定狀態(tài)。
　　2.本研究表明，分娩方式是影響腸道菌群初始化定植的因素之一，剖宮產(chǎn)兒腸道中雙歧桿菌的定植和達(dá)優(yōu)勢(shì)化時(shí)間均晚于陰道分娩兒，直至生后第6個(gè)月時(shí)兩組嬰兒腸道菌群構(gòu)成接近，并趨于穩(wěn)定。
　　3.進(jìn)一步的隨訪中發(fā)現(xiàn)，分娩方式可影響嬰兒遠(yuǎn)期過敏性疾病發(fā)生率，表現(xiàn)為剖宮產(chǎn)兒遠(yuǎn)期過敏性疾病發(fā)生率高于陰道分娩兒。
　　4.本研究結(jié)論證實(shí)了分娩方式是通過對(duì)腸道菌群初始化定植和變遷的影