2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:體外建立白色假絲酵母菌(candida albicans C.a)感染入口腔黏膜上皮細胞(hOMECs)模型,探討人重組白介素17A(rhIL-17A)對hOMECs表達β-防御素(hBDs)、S100A8及LL-37的影響及其抑制C.a感染hOMECs的作用。
  方法:1.觀察Ca感染hOMECs過程中rhlL-17A抑制C.a感染hOMECs的情況。進一步采用100μg/L rhlL-17A處理C.a24h后,激光共聚

2、焦顯微鏡下觀察rhlL-17A對C.a生長繁殖及形態(tài)結構的影響。
  2.探索不同濃度的rhlL-17A對hOMECs表達hBDs的影響:選用1、10、100、1000μg/L的rhlL-17A分別刺激hOMECs48h,采用ELISA和RT-PCR分別檢測hBD-1,2,3的蛋白及mRNA表達水平。
  3.將細胞隨機分為4組:空白對照組;單獨C.a處理組(模型組);單獨rhlL-17A處理組;rhlL-17A與C.a處理

3、組(實驗組)。用C.a感染hOMECs2h(感染復數(shù)MOI=0.1),建立C.a感染hOMECs模型,再用100μg/L的rhlL-17A處理hOMECs或感染C.a的hOMECs模型24 h,收集細胞培養(yǎng)上清液,稀釋后重新接種到沙氏培養(yǎng)基中,通過數(shù)菌落數(shù)計算C.a黏附率。ELISA方法檢測上清液中hBD-1,2,3水平,RT-PCR檢測貼壁細胞的hBD-1,2,3、S100A8、LL-37的mRNA表達水平。
  結果:1.C.

4、a感染hOMECs過程中,光鏡下可見C.a形成菌絲并感染hOMECs引起細胞死亡,而在rhlL-17A的作用下,實驗組中C.a無菌絲形成,無C.a感染hOMECs;激光共聚焦顯微鏡觀察到在rhIL-17A作用下的C.a生長繁殖停止,無菌絲及菌落形成。
  2.與模型組比較,在rhlL-17A的作用下,C.a對hOMECs的黏附率降低,但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
  3.RT-PCR結果顯示,10、100、1000μ

5、g/L的rhlL-17A均能誘導hOMECs表達hBD-2,分別與空白對照組比較均有統(tǒng)計學差異,(P<0.05),各濃度組兩兩比較均具有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。ELISA結果顯示,1、10、100、1000μg/L的rhlL-17A均能誘導hOMECs表達hBD-2,分別與空白對照組比較均有統(tǒng)計學差異,(P<0.001),各濃度組兩兩比較均具有統(tǒng)計學差異(P<0.001),100μg/L組hBD-2 mRNA水平及蛋白水平升高最為顯

6、著。
  4.hOMECs中的hBD-2水平在C.a及100μg/L的rhlL-17A的誘導下呈表達上調,(P<0.05),rhlL-17A誘導能力高于模型組,差異有統(tǒng)計學意義,(P<0.05);在C.a的激惹下,hBD-2表達水平均高于模型組和rhlL-17A組,(P<0.05)。S100A8 mRNA、LL-37 mRNA水平在C.a的誘導下表達下降,(P<0.05),在rhlL-17A的刺激下呈表達上調(P<0.05),S1

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