黃芪甲苷聯(lián)合遠程缺血后適應(yīng)對急性心肌梗死大鼠保護作用及機制研究.pdf

1、目的:本課題應(yīng)用急性心肌梗死大鼠模型，觀察黃芪甲苷聯(lián)合肢體遠程缺血后適應(yīng)對心梗大鼠缺血心肌的保護作用，并探討其可能機制。
　　方法:通過結(jié)扎左前降支建立大鼠急性心肌梗死模型，取造模成功的雄性SD大鼠60只，隨機分4組:心梗模型組(n=15)、黃芪甲苷組(AS-Ⅳ)(n=15)、遠程缺血后適應(yīng)組(RIPOST)(n=15)、聯(lián)合組（AS-Ⅳ+RIPOST）(n=15);另取10只為假手術(shù)組;AS-Ⅳ在術(shù)后持續(xù)灌胃(50mg/kg/d

2、)2周;RIPOST組在大鼠右后肢盡可能靠近腹股溝處纏繞止血帶6圈，5min缺血，5min再灌注，每天在同一時間共進行3個循環(huán);聯(lián)合組每天在給予AS-Ⅳ后進行RIPOST操作;模型組、假手術(shù)組與RIPOST組灌胃等量生理鹽水。所有干預(yù)持續(xù)2周。手術(shù)后2周內(nèi)描記生存曲線，通過心臟彩超觀測心功能各項指標(biāo);處死大鼠肉眼觀察心臟大體結(jié)構(gòu);稱重計算心臟體重比;觀察心梗面積;同時進行伊紅-蘇木精染色以及Masson染色;通過末端標(biāo)記法方法檢測缺血組

3、織心肌細胞凋亡的表達;透射電鏡觀測心肌組織超微病理結(jié)構(gòu)改變;Western Blot方法檢測p-AKT、VEGF、Bcl-2、Bax、NF-κ B、iNOS等蛋白表達。
　　結(jié)果:1.黃芪甲苷與遠程缺血后適應(yīng)干預(yù)均可以提高心肌梗死大鼠生存率，其中聯(lián)合干預(yù)組與模型組相比具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);聯(lián)合干預(yù)組與AS-Ⅳ組和RIPOST組相比未達到統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.1903及P=0.0835);
　　2.AS-Ⅳ組、RIPO

4、ST組與聯(lián)合干預(yù)組均能夠改善心梗大鼠的心功能，改善LVEF、LVFS，與AS-Ⅳ組與RIPOST組相比，聯(lián)合組效果更為明顯(P＜0.01);
　　3.AS-Ⅳ組、RIPOST組與聯(lián)合干預(yù)組與模型組相比心臟體重比均有不同程度下降，均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）;聯(lián)合干預(yù)組心臟體重比下降最明顯，AS-Ⅳ組次之，RIPOST組最次;其中聯(lián)合干預(yù)組與RIPOST組相比具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);
　　4.AS-Ⅳ組、RIPOS

5、T組、聯(lián)合干預(yù)組與模型組相比均可以減少大鼠心梗面積(P＜0.01)，聯(lián)合干預(yù)組與AS-Ⅳ組或RIPOST組相比，梗死面積更小，且均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);
　　5.AS-Ⅳ組、RIPOST組心肌細胞壞死情況較模型組少，纖維組織增生較少，少量炎細胞浸潤;聯(lián)合干預(yù)組病變程度最輕，較AS-Ⅳ組、RIPOST組均有改善。
　　6.α-SMA免疫組化觀察AS-Ⅳ組新生小動脈較RIPOST組多;在聯(lián)合干預(yù)組，可見小動脈新生數(shù)量較單

6、獨AS-Ⅳ組RIPOST組更多(P＜0.01);與模型組相比，AS-Ⅳ與RIPOST均可以促進心肌組織血管內(nèi)皮生長因子VEGF及對在血管新生信號通路中起重要作用的蛋白p-AKT的表達(P＜0.01)，與單獨運用AS-Ⅳ及RIPOST相比，將兩種治療策略聯(lián)合可以得到協(xié)同作用;
　　7.AS-Ⅳ組與RIPOST組均能不同程度地下調(diào)NF-κB、iNOS等炎性因子的表達(P＜0.01)，而兩者聯(lián)合干預(yù)下調(diào)趨勢更為明顯。AS-Ⅳ與RIPOS

7、T均可以在降低促凋亡因子Bax表達的同時上調(diào)抑制凋亡因子Bcl-2的表達(P＜0.01)，而兩者聯(lián)合干預(yù)后可以取得協(xié)同作用，進一步降低缺血梗死的心肌組織促凋亡因子Bax的分泌并上調(diào)抗凋亡因子Bcl-2的分泌，同時心肌組織Tunel/DAPI免疫熒光從組織病理學(xué)上再次印證這一結(jié)果;
　　8.AS-Ⅳ組、RIPOST組心肌細胞超微結(jié)構(gòu)病理損傷程度較模型組變少，肌絲排列較為有序，其中RIPOST組纖維化程度較AS-Ⅳ組為輕;聯(lián)合干預(yù)組超