骨軟骨組織體外培養(yǎng)保存方法的探索.pdf

1、泰山醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文骨軟骨組織體外培養(yǎng)保存方法的探索姓名：胡遵杰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：亓建洪201205組為基礎(chǔ)培養(yǎng)液加100ng／m1的IGFI；III組為基礎(chǔ)培養(yǎng)液加001nun01／L的EGCG；Ⅳ組為基礎(chǔ)培養(yǎng)液同時(shí)加入100ng／ml的IGFI和001mmol／L的EGCG。將這四組培養(yǎng)瓶保存于第一步得出的最佳溫度與液體處理?xiàng)l件中。分別檢測(cè)新鮮、7天、21天、42天、56天之后組織細(xì)胞的存活率、HE、番紅O

2、染色及II型膠原SABCFITC免疫熒光染色。分析各組保存效果。結(jié)果第一部分，除保存7天時(shí)溫度因素，以及溫度與液體處理兩因素交互作用對(duì)細(xì)胞存活率沒(méi)有影響之外，其余各時(shí)間點(diǎn)的溫度因素、液體處理因素及溫度與液體處理兩因素交互作用都對(duì)細(xì)胞存活率的變化產(chǎn)生了影響，其中保存7天、21天、35天時(shí)細(xì)胞存活率最高值分別為9088士369％、8831士393％、7869士856％，均出現(xiàn)在4℃條件下?lián)Q液保存組。對(duì)各組番紅O的分析除了保存7天時(shí)A組IOD

3、值明顯高于其他三組外，其他保存時(shí)間點(diǎn)IOD值組間比較無(wú)顯著差異。各組保存效果隨著時(shí)間的延長(zhǎng)出現(xiàn)了明顯的下降趨勢(shì)，且下降速率從保存21天起迅速增加。因此，4℃條件下?lián)Q液保存法保存骨軟骨組織效果比37℃j不換液效果好。第二部分，保存7天時(shí)，基礎(chǔ)培養(yǎng)液組(I)、基礎(chǔ)培養(yǎng)液IGFI組(II)、基礎(chǔ)培養(yǎng)液EGCG組(III)細(xì)胞存活率組間無(wú)明顯差別，均從新鮮的8745士359％降至81％左右，基礎(chǔ)培養(yǎng)液EGCGIGFI組(Ⅳ)為6372士1242

4、％，出現(xiàn)明顯下降；保存21天時(shí)，后二組細(xì)胞存活率下降明顯，分別低至7017士388％和6469士563％，明顯低于前兩組的7858士310％和8041士387％；保存42天和56天時(shí)，各組各檢測(cè)指標(biāo)均出現(xiàn)大幅下降，降至20％左右，組間差別不大，已無(wú)分析意義。對(duì)番紅O染色和II型膠原染色也表現(xiàn)出了相同的差別與變化趨勢(shì)。各組保存效果隨著時(shí)間的延長(zhǎng)出現(xiàn)了明顯的下降趨勢(shì)，且下降速率從保存21天起迅速增加。因此，培養(yǎng)液中加入100ng／ml的IG