單寧酸對(duì)布氏田鼠下丘腦弓狀核食欲調(diào)控基因表達(dá)和血清瘦素水平的影響.pdf

1、植物次生代謝物是植物對(duì)植食性動(dòng)物進(jìn)行化學(xué)防御的產(chǎn)物。具有苦澀味的單寧酸是一種重要的次生代謝物，影響植食性動(dòng)物的取食行為。下丘腦弓狀核神經(jīng)元分泌的神經(jīng)肽Y(neuropeptide Y NPY)和刺鼠相關(guān)蛋白(agouti-related protein，AgRP)可以增強(qiáng)動(dòng)物食欲，而阿片-促黑素細(xì)胞皮質(zhì)素原(pro-opiomelanocortin，POMC)抑制動(dòng)物食欲，它們均受味覺系統(tǒng)的調(diào)控。血清中的瘦素與下丘腦弓狀核神經(jīng)元上的瘦素

2、受體(OB-Rb)相互作用，可調(diào)節(jié)NPY、AgRP及POMC等食欲調(diào)控基因的表達(dá)。布氏田鼠是我國(guó)內(nèi)蒙古草原的主要植食性動(dòng)物，其所取食的植物含大量次生化合物。本研究以室內(nèi)繁殖的布氏田鼠為研究對(duì)象，用不同劑量（0％、3％及6％，分別為對(duì)照組、低劑量組和高劑量組）的單寧酸分四個(gè)時(shí)間(1d、5d、10d以及20d)連續(xù)處理布氏田鼠，用反轉(zhuǎn)錄實(shí)時(shí)熒光定量PCR法(reversetranscription quantitative real-tim

3、e PCR，RT-qPCR)測(cè)定下丘腦弓狀核食欲調(diào)控基因的mRNA表達(dá)量變化，用免疫組化法(Immunohistochemistry，IHC)測(cè)定下丘腦弓狀核食欲調(diào)控蛋白的表達(dá)量變化，用ELISA法測(cè)定血清中瘦素水平的變化，以探討單寧酸對(duì)布氏田鼠攝食中樞的影響，闡明單寧酸影響動(dòng)物取食行為的神經(jīng)機(jī)制，為動(dòng)植物協(xié)同進(jìn)化提供理論依據(jù)。研究結(jié)果如下:
　　1、處理1d后，只有高劑量的單寧酸可以抑制雌雄布氏田鼠弓狀核NPY和AgRP mRN

4、A的表達(dá)，促進(jìn)POMC mRNA的表達(dá);處理5d和10d后，高低劑量的單寧酸溶液均抑制雌雄布氏田鼠NPY和AgRP mRNA的表達(dá)，促進(jìn)POMC mRNA的表達(dá);處理20d后，高低劑量的單寧酸仍然抑制雌性動(dòng)物NPY和AgRP mRNA的表達(dá)，促進(jìn)POMC mRNA的表達(dá)。而對(duì)雄性動(dòng)物而言，只有低劑量的單寧酸溶液僅促進(jìn)NPYmRNA的表達(dá)。但各劑量的單寧酸對(duì)于雌雄布氏田鼠下丘腦弓狀核OB-Rb mRNA的表達(dá)均無(wú)顯著影響。
　　2、

5、免疫組化結(jié)果表明，處理1d后，僅高劑量的單寧酸使雌雄布氏田鼠下丘腦弓狀核POMC的含量增加;處理5d后，高低劑量的單寧酸溶液均抑制雌雄動(dòng)物NPY的表達(dá)，抑制雄性動(dòng)物AgRP的表達(dá)，增加雌性動(dòng)物POMC的含量。而只有高劑量單寧酸抑制雌性動(dòng)物AgRP的表達(dá)，增加雄性動(dòng)物POMC的含量;處理10d后，高低劑量的單寧酸均可抑制雌雄田鼠NPY和AgRP的表達(dá)，促進(jìn)POMC的表達(dá);處理20d后，高低劑量的單寧酸仍然抑制雌性田鼠NPY和AgRP的表達(dá)

6、，促進(jìn)POMC的表達(dá);但對(duì)雄性田鼠沒有顯著影響。同樣，各劑量單寧酸對(duì)于雌雄布氏田鼠下丘腦弓狀核OB-Rb的表達(dá)無(wú)顯著影響。
　　3、給雌雄布氏田鼠的口腔舌表面滴灌不同劑量的單寧酸溶液后，在四個(gè)處理時(shí)間段，對(duì)照組、低劑量組和高劑量組的體重之間沒有顯著差異，表明單寧酸對(duì)布氏田鼠的體重?zé)o顯著影響;
　　4、給雌雄布氏田鼠的口腔舌表面滴灌不同劑量的單寧酸溶液后，在不同的處理時(shí)間段，對(duì)照組、低劑量組和高劑量組的血清瘦素水平之間沒有顯著