2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:本實驗旨在研究外周炎癥時,通過改變下丘腦弓狀核(hypothalamic arcuate nucleus,ARC)區(qū)的Src酪氨酸蛋白激酶的表達,觀察NMDA受體(N-methyl-D-aspartic acid receptor,NMDAR)的NR2B亞單位及相關信號分子如PKC、PKA、CaMKII的變化,探討Src對外周炎癥引起的痛覺過敏的影響。
  方法:用完全弗氏佐劑(Complete Freund'sAdjuva

2、nt,CFA)建立大鼠外周炎癥模型;用Von Frey(VFF)法和熱輻射-縮腿法測定大鼠痛閾變化;用轉棒實驗(rota-rod test)測定大鼠的運動功能變化;用Western Blot方法檢測ARC區(qū)域NR2B,pNR2B(Y1472),Src,pSrc(Y416),PKA,PKCγ,pCaMKIIα(T286)的蛋白表達;ARC內微量注射NMDA受體抑制劑MK-801、含NR2B的NMDA受體抑制劑ifenprodil、PKC抑

3、制劑chelerythrine、Src抑制劑PP2或Src小發(fā)夾結構RNA(shRNA)慢病毒,觀察CFA炎癥大鼠蛋白表達變化以及對大鼠痛覺過敏的影響。
  結果:1、CFA炎癥大鼠在造模后1、3、5、7、14天痛閾顯著低于對照組大鼠(P<0.05或0.001),表現(xiàn)為熱輻射縮腿潛伏期縮短和VFF縮腿閾值降低,即出現(xiàn)痛覺過敏。2、與造模前比較,注射CFA后的1、3、7、14天,ARC組織內的Src和NR2B無論是蛋白總量還是磷酸化

4、水平都明顯升高(P<0.05),PKCγ表達亦明顯升高(P<0.05);pCaMKIIα表達在1、3、7天明顯下降(P<0.05);PKA表達無明顯變化(P>0.05)。3、在造模后7天的大鼠ARC內分別微量注射MK-801,ifenprodil,chelerythrine,或PP2,機械痛閾與熱痛閾均較對照組有不同程度的反轉,在20min或30min時間點作用最大(P<0.05,0.01或0.001)。4、Src慢病毒下調外周炎癥大鼠

5、ARC內Src、pSrc的蛋白表達(P<0.05,0.01或0.001);造模后3天,Src慢病毒組(LV-sh-src+CFA組)的NR2B、pNR2B、PKCγ蛋白表達較對照組(na?ve+CFA組或LV-sh-NC+CFA組)出現(xiàn)顯著下降(P<0.05或0.01);造模后7天,Src慢病毒組的pNR2B蛋白表達仍較對照組明顯下降(P<0.05或0.001);造模后14天,Src慢病毒組的NR2B、pNR2B、PKCγ表達與對照組比

6、較雖仍呈下降趨勢但已沒有統(tǒng)計學意義(P>0.05);Src慢病毒組的PKA、pCaMKIIα表達與對照組相比,無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。5、大鼠ARC內感染Src慢病毒后,對外周炎癥誘發(fā)的機械痛敏有顯著影響,即造模后3、7、14天Src慢病毒組的機械痛閾與空載對照組相比顯著升高,有統(tǒng)計學意義(P<0.05);Src慢病毒組的熱痛敏亦發(fā)生改變,即造模后3、14天Src慢病毒組的熱痛閾升高,與空載對照組比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

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