植物角質膜蠟質轉錄因子基因SHN1-WIN1的表達載體構建.pdf

1、在植物的生命活動中常遭受病害，蟲害，旱害，紫外線損傷等一系列環(huán)境脅迫。植物為了保護自身免遭各種脅迫，在其表面形成一種角質膜的結構，是植物與外部環(huán)境之間的第一道屏障。角質膜組分沉積在植物地上部分外表皮細胞壁的表面，主要由角質和蠟質組成，蠟質組分沉積在角質的表面或嵌插在其中間，這種半剛性疏水結構使角質膜成為有效防水和保護內部組織的屏障。角質膜的成分和滲透性會影響植物對各種生物和非生物脅迫的抵抗力。目前在植物抗逆基因工程領域，通過轉錄因子來提

2、高植物的抗逆性成為研究熱點。從擬南芥中分離的與蠟質相關的轉錄因子WIN1/SHN1，可通過直接或間接地激活角質和蠟質生物合成途徑中編碼酶的基因的轉錄，在擬南芥中過表達，使得角質膜的滲透性改變，能增加蠟質含量，提高植物的抗旱性。
　　 本試驗選取了大葉黃楊(Euonymusjaponicus)，辣椒(Capsicumfrutescens)為研究材料，首先通過酶處理法得到大葉黃楊葉片和辣椒果實的角質膜，通過掃描電子顯微鏡觀察分析角質

3、層紋飾的走向，蠟質和角質的超微結構，得出大葉黃楊葉片蠟質層厚而密，呈片狀結構，角質的網(wǎng)狀結構孔徑相對較小而規(guī)則；而辣椒果實的蠟質層薄，蠟質晶體堆積，分布不均勻，角質的網(wǎng)狀結構孔徑大，不規(guī)則。
　　 本實驗以野生型擬南芥花蕾中提取的總RNA為模板，通過RT-PCR的方法擴增到與角質和蠟質合成相關的轉錄因子基因，該目的基因片段SHN1/WIN1(SHN1/WAXINDUCER1約600bp，將此片段克隆到PMD-19T載體上，經(jīng)測序